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过表达载体引物设计（在带有强启动子的载体上插入自己的基因）：
（1）载体同源臂序列（20 bp）+酶切位点序列（6 bp）+目的片段序列（18-22 bp）
F: 限制性内切酶前面的15-20 bp
R: 限制性内切酶后面的15-20 bp
载体同源臂序列取决于酶切位点
同源臂序列的确定.jpg
（2）酶切位点选择的原则：
（3）Primer 5 软件设计目的基因序列
a. 保证F引物从ATG开始；R引物跨终止密码子
b. F primer length (18-22/17-23 bp)
构建过表达载体引物设计
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