1个载体连3个片段，都是用pcr方式扩增，能扩出正确条带，回收后还对载体DpnI酶切处理了，加入seamless混合酶50℃反应半小时到50分钟左右，转化涂板能长满板，可就是用验证引物菌P验证没一个有条带的，思来想去查了很多就是不知道问题出在哪里了。请求各路大神帮忙解答一下，谢谢了！
Gibson无缝克隆总是失败
©著作权归作者所有,转载或内容合作请联系作者
平台声明：文章内容（如有图片或视频亦包括在内）由作者上传并发布，文章内容仅代表作者本人观点，简书系信息发布平台，仅提供信息存储服务。
平台声明：文章内容（如有图片或视频亦包括在内）由作者上传并发布，文章内容仅代表作者本人观点，简书系信息发布平台，仅提供信息存储服务。
推荐阅读更多精彩内容
- 上一部分中介绍了最最基础的PCR反应和传统分子克隆，包括内切酶，连接酶，外切酶，PCR扩增，转化等等是之后所有分子...
