大家经常在文献中看到非常好看的序列比对图,现在笔者将目前见过的最好看的序列比对图的作图方法作分享,希望对大家的科研工作有所帮助,效果图如下:
1.在蛋白质数据、Genbank、Uniprot等数据库搜索得到蛋白质序列,本例对lactoferrin [Bos taurus]和lactoferrin [Homo sapiens]的蛋白质序列作比对,并得到序列比对图;
2.打开ClustalW网站 (http://www.genome.jp/tools-bin/clustalw),采用Clustal算法进行序列比对,输入格式如下(注意氨基酸序列粘贴进去直接提交末尾不要加*号,会报错),点击Execute Multiple Alignment进行序列比对;
3.比对完成后,会自动弹出结果页面,点击clustalw.aln下载该序列比对文件,该文件即包含了两个序列的比对结果;
4.打开ENDscript/ESPript网站 (http://espript.ibcp.fr/ESPript/cgi-bin/ESPript.cgi)对序列比对结果进行作图,点击选择文件上传得到的clustalw.aln文件,再点击页面顶部的SUBMIT按钮即可,注意在该页面的底部可以选择输出的文件类型以及图片格式,主要有.png和.TIF格式的图片,两种格式的图片都可以作为文章发表;
5.完成后,会自动弹出结果页面,本文只勾选了pdf文档,因此只输出了以下两个文件,随便哪一个都可以打开;
6.最终得到额结果文件内容如下,可以采用PS等图形处理软件进行处理和加工,比如缩小两行序列之间的间距等。
备注:
1.通过ClustalW工具得到的序列比对文件不一定正确,毕竟只是人设计的软件,不能代替人,可以手动调整序列,使其匹配程度更高;
2.很多情况下,大家会遇到点击Submit后,浏览器并没有弹出结果文件的页面,这时需要将ENDscript/ESPript 网站(http://espript.ibcp.fr/ESPript/cgi-bin/ESPript.cgi )添加到可信任站点里面,或者白名单。
microsoft edge添加信任站点方法(www.iuuu9.com/article/69526)。