一、产品概述
由艾美捷Bethyl Laboratories推出的eIF4G1/eIF4GI抗体（货号A300-502A）是一款针对人真核翻译起始因子4γ1（eIF4G1）的兔源多克隆抗体，由美国制造，采用抗原亲和纯化工艺制备。该抗体以未偶联的完整IgG形式提供，浓度为1000 µg/ml，主要适用于免疫印迹（WB）检测，是研究蛋白质翻译起始过程的理想工具。
二、技术规格
参数 | 详细信息
靶标 | eIF4G1 / eIF4GI
反应性 | 人
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
格式 | 完整IgG
亚型 | IgG
偶联物 | 未偶联
纯度 | 抗原亲和纯化
抗原物种 | 人
浓度 | 1000 µg/ml
保存条件 | 2-8°C
有效期 | 收货后1年
缓冲液体系：Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液，pH 7-8，含0.09%叠氮化钠作为防腐剂。
三、免疫原与纯化工艺
该抗体识别的表位位于人eIF4G1蛋白第575至625位氨基酸残基之间（编号参考NP_886553.2，GeneID 1981）。亲和纯化过程使用固相载体上固定的eIF4G1特异性表位进行。
抗体浓度通过比尔定律测定，其中1 mg/mL IgG在280 nm波长下的吸光度为1.4。
应用方法与实验条件：
免疫印迹（WB）
推荐稀释比：1:2000 至 1:10000
封闭与稀释液：5% 牛奶-TBST
一抗孵育：过夜孵育
检测系统：使用山羊抗兔IgG重轻链抗体（A120-101P）进行细胞裂解物的免疫印迹检测
适用范围：根据产品规格，该抗体目前验证并推荐的实验应用为免疫印迹（WB）。尚未提供免疫沉淀（IP）或免疫组化（IHC）的验证数据，建议使用者自行优化或参考相关文献。
四、产品背景信息
eIF4G1在翻译起始中的角色
真核翻译起始因子4γ1（eIF4G1）是人体内两种eIF4G蛋白之一（另一种为eIF4G3）。eIF4G是eIF4F异源三聚体复合物的一个亚基，该复合物由eIF4A、eIF4E和eIF4G组成。eIF4F复合物在蛋白质合成过程中负责将核糖体招募至带帽mRNA的5’末端。
支架功能
在eIF4F复合物中，eIF4G充当支架蛋白，桥接帽结合亚基eIF4E与RNA解旋酶eIF4A。这一结构安排使得eIF4A能够解开mRNA 5’非翻译区的二级结构，从而允许43S前起始复合物扫描并定位起始密码子。eIF4G因此成为翻译调控的关键节点，整合了多种信号通路对蛋白质合成的调控。
五、病理生理学意义
eIF4G1的异常表达或功能失调与多种疾病相关，包括癌症（翻译失控）、神经退行性疾病（如帕金森病，PARK18相关）等。靶向eIF4G1的研究有助于理解细胞生长、增殖和存活过程中翻译调控的分子机制。
别名：
EIF4F、EIF4G、eIF-4G 1、EIF-4G1、EIF4-gamma、eIF-4-gamma 1、EIF4GI、eucaryotic translation initiation factor 4G、eukaryotic translation initiation factor 4 gamma 1、P220、PARK18
六、使用建议与优化指南
1. 稀释比优化
建议初次使用时在1:2000至1:10000范围内进行梯度稀释实验。高浓度（1:2000）适用于低表达水平的样本或需要强信号的检测；低浓度（1:10000）适用于高表达样本或追求低背景的情况。由于抗体浓度为1000 µg/ml，1:10000稀释相当于最终使用浓度为0.1 µg/ml，说明该抗体具有较高的亲和力。
2. 样本制备
建议使用含蛋白酶抑制剂的RIPA或NP-40裂解液制备细胞裂解物
每孔上样量建议为20-50 µg总蛋白（视目标蛋白表达丰度而定）
加热变性时避免过度煮沸，以防蛋白聚集
3. 封闭与抗体稀释
严格按照产品说明使用5% 牛奶-TBST进行封闭和抗体稀释。牛奶中的酪蛋白能有效减少非特异性结合，同时不影响该抗体对eIF4G1的特异性识别。
4. 检测系统选择
推荐使用山羊抗兔IgG重轻链抗体（A120-101P）作为二抗。如需检测内源性轻链或避免重链干扰（例如IP后WB），可选用抗兔IgG轻链特异性二抗。
5. 阳性对照建议
HeLa、HEK293、A549等常见细胞系裂解物可作为阳性对照
eIF4G1分子量约220 kDa，建议使用适当浓度的分离胶（如6-8% SDS-PAGE）以获得良好分辨
6. 储存注意事项
收到抗体后请存放于2-8°C，切勿冷冻
冷冻会导致抗体聚集和活性丧失
叠氮化钠存在下，该抗体在2-8°C可稳定保存1年
7. 实验记录
由于该抗体为多克隆抗体，不同批次间可能存在效价差异。建议记录每次实验的稀释比、曝光时间和信号强度，以便批次间校准。
