结直肠癌各种动物模型构建

A. 条件性Cre重组酶模型

1 使用CDX2启动子驱动Cre重组酶表达,特异性作用于远端回肠、盲肠和结肠上皮

2 将携带floxed Apc基因的小鼠与CDX2P-NLSCre小鼠交配,Cre重组酶介导Apc基因在肠道上皮的特异性敲除,3周后监测结肠特异性肿瘤形成。

B. 他莫昔芬诱导模型

构建CDX2-Cre-ERT2转基因小鼠与floxed Apc基因的小鼠杂交,腹腔注射他莫昔芬(75 mg/kg,连续3-5天),热休克蛋白释放Cre-ERT2进入细胞核,激活重组酶介导APC基因敲除。通过结肠镜或直肠出血症状监测肿瘤。

C. AOM/DSS诱导模型

腹腔注射致癌剂AOM(10-12 mg/kg);5天饮用含2% DSS的水(每2天更换),恢复常规饮水14天为一个周期;重复2个DSS处理周期。观察腹泻、便血、体重变化等临床症状。实验终点解剖检查结直肠息肉/肿瘤。

异种移植模型

A. 皮下移植模型

免疫缺陷小鼠(裸鼠/NSG)准备,CRC细胞悬液(PBS配制)注射至侧腹皮下,定期测量肿瘤体积(游标卡尺)。终点取瘤称重并进行分子分析(IHC/WB/qPCR)

B. 原位移植模型

荧光标记CRC细胞(如luciferase),开腹手术暴露盲肠;细胞悬液注射至盲肠浆膜层;活体成像监测肿瘤生长(IVIS系统注射D-luciferin);结肠镜定期评估肿瘤进展。

C. 患者来源异种移植(PDX)

手术获取患者肿瘤组织;机械/酶解处理成细胞悬液或3D类器官;传代3次建立稳定模型,移植至NSG小鼠盲肠原位;用于个性化药物敏感性测试。

治疗应用模型

A. 同源皮下模型

从转基因小鼠(如ApcMin/+)分离CRC细胞,注射至同品系免疫健全小鼠皮下,研究肿瘤-免疫系统相互作用,测试免疫检查点抑制剂疗效。

B. 原位治疗模型

建立稳定原位肿瘤后随机分组,通过灌胃/腹腔注射给药,动态监测肿瘤标志物(如CEA),终末采集肿瘤组织进行病理分级,同步分析转移灶(常见于肝/肺)。

总结于文献:“ Colorectal cancer murine models: Initiation to metastasis ”,《cancer letter》。

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