Bio-Rad的mycycler PCR仪器的使用

探序基因肿瘤研究院整理

仪器介绍：

MyCycler 是一款 96 孔高性价比 PCR 仪。它配备有12 厘米(4 .7") 高分辨率显示屏，用户可以容易而快速的进行程序编写。人性化的菜单可以帮助用户以最快的速度完成反应的各项设置。其具体性能如下：

• 96 孔反应模块，专为0 .2ml 的 PCR 反应管或反应板而设计

• 直观的程序编写设置，包括温度、时间和程序等

• 用户可设置休眠模式使其更节电

• 仪器每次运行情况会保存在运行报告和校正报告中

• 自动调节式热盖适合于各种标准的 0 .2ml PCR 反应管，条管和反应板

• 可选择进行梯度 PCR 功能升级，可以同时在8个不同温度条件下孵育，以便在一次实验中优化实验条件

简明操作说明：

步骤：1、开机：短时按开关键,打开开关

2、如果要运行已经编好的程序，则直接按F1，用箭头键↓←↑→选择已储存的程序，按ENTER，用箭头键↓←↑→选择RUN按ENTER键，则开始执行程序。

3、如果要输入新的程序，则：

开机后按F2;选择CUSTOM,按ENTER键;按要求用F4增减SYSTLE或STEP;编辑温度和和时间；按ENTER键编辑程序名称，储存。

4、输入完成的程序后，到RUN-ENTER菜单，选择新程序，开始运行。

5、其它：用《stop》停止运行的程序。

编辑已有的程序：

进入开机界面后，按F1，选择程序，按ENTER确认，用箭头键↓←↑→选择EXIT按ENTER键，编辑修改，按ENTER键储存。选择修改程序，按F5运行。

如何设置一个PCR体系：一般分为：

1、预变性：可用94-95℃，2-10min,一般用5min。2、变性：一般用94℃，30s-2min,一般45s-1min。

3、退火：温度自定，30s-2min。4、延伸：70-75℃，一般72℃，对于〈2kb,<1min；>2kb,每增加1kb加1min。5、循环数：一般25-35个循环。6、最终延伸：72℃，5-15min。7、保存：12℃，时间设为无穷。

使用注意事项

1、此型号PCR仪为96反应模块，用0.2ml平顶管或96孔PCR板；

2、如果在扩增过程中出现突然停电的情况，请立刻向实验室工作人员报告（突发停电情况有损设备）；

3. 程序中最终的保温温度请设置为12-18 °C，反应结束后尽快将样品取出，以免影响设备半导体的寿命。