1. 产品概述
由艾美捷代理Bethyl推出的兔抗PBEF多克隆抗体(货号:A300-372A),经抗原亲和纯化获得,特异性识别PBEF蛋白(又称NAMPT或Visfatin)。抗体靶向人PBEF氨基酸序列第400至450位之间的特异性表位,适用于免疫组化、免疫沉淀及蛋白质印迹等多种应用场景。
2. 核心规格参数
项目 | 规格详情
靶标| PBEF(前B细胞增强因子)
验证反应种属| 人,小鼠
宿主| 兔
克隆性| 多克隆
抗体形式| 完整IgG分子
免疫原表位| 人PBEF蛋白第400–450位氨基酸区域(Swiss-Prot P43490)
亚型| IgG
标记物| 无标记(非偶联)
纯度| 抗原亲和纯化
浓度| 1000 µg/mL(1 mg/mL)
缓冲液体系| Tris-柠檬酸盐-磷酸盐缓冲液,pH 7–8,含0.09%叠氮化钠
储存条件| 2 – 8 °C(请勿冷冻)
保质期| 自收货之日起1年
3. 产品制备与质控
纯化工艺:采用固相载体固定PBEF特异性表位肽段,进行亲和层析纯化,确保仅保留识别目标表位的高亲和力抗体。
表位定位:本抗体(货号A300-372A)识别的表位位于人PBEF蛋白第400至450位氨基酸残基之间(参考Swiss-Prot P43490及GeneID 10135)。
浓度测定:免疫球蛋白浓度依据比尔-朗伯定律测定,其中1 mg/mL IgG在280 nm波长处的吸光值(A280)为1.4。
4. 推荐工作稀释度
以下稀释度基于标准实验条件确立,具体用量需根据样品类型及实验体系进一步优化:
应用方法 | 推荐稀释度/用量 | 备注
Western Blot(WB)| 1:10,000 – 1:25,000 | 使用5% Milk-TBST作为封闭液和抗体稀释液,一抗孵育过夜。检测细胞裂解物时推荐使用抗兔IgG H&L链二抗(如A120-101P)。
Immunohistochemistry(IHC)| 1:2,000 – 1:10,000 | 推荐使用柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0)进行抗原修复(适用于FFPE组织切片)。
Immunoprecipitation(IP)| 6 µg/mg 裂解物 | 免疫沉淀后Western Blot检测时,建议使用抗兔IgG轻链HRP标记二抗,并在封闭液中添加5%正常猪血清(Cat. No. S100-020)以减轻重链干扰。
5. 靶标生物学背景
PBEF(前B细胞增强因子)亦称为Visfatin(内脏脂肪素)或NAMPT(烟酰胺磷酸核糖转移酶)。其生物学功能具有双重性:
分泌型功能:作为脂肪因子,在脂肪细胞中高表达,可与胰岛素受体结合发挥降糖效应。其血清水平与肥胖及2型糖尿病呈正相关。
胞内功能:作为胞浆酶,参与烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)的合成代谢,调控细胞能量状态和NAD依赖性酶的活性。
本抗体可同时识别细胞内源性和分泌性PBEF,适用于代谢疾病、炎症及肿瘤微环境等相关研究。
6. 使用与储存注意事项
1. 储存:请于 2–8 °C 避光保存。切勿冷冻,以免抗体变性或聚合。
2. 稳定性:在推荐储存条件下,自收货之日起1年内稳定有效。
3. 防腐剂提示:缓冲液含0.09%叠氮化钠,对呼吸系统及黏膜有刺激性,操作时请穿戴适当防护装备。叠氮化钠可能干扰部分偶联反应(如HRP标记),若需偶联使用,请预先透析去除。
4. 种属交叉性:已验证可识别人及小鼠来源的PBEF。用于其他种属时建议预先验证。
*本说明书仅供研究使用,不适用于诊断或治疗程序。