- 标题:Enrichment of oral-derived bacteria in inflamed colorectal tumors and distinct associations of Fusobacterium in the mesenchymal subtype
- 发表时间:2023/02/21
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发表期刊:Cell Reports Medicine
实验设计:
- 全转录组 RNA对来自 CRC 患者的 807 个肿瘤组织进行测序(Whole RNA Sequencing),以同时表征肿瘤和其中存在的微生物的基因表达。
- 将结果与两项荟萃分析的结果进行了比较,这两项荟萃分析检查了来自 CRC 患者和健康对照者的 208 份唾液和 852 份粪便样本中的微生物。
- 将发现与 TCGA 的 587 个样本进行了基准比较 基因组图谱 (TCGA)。
结果:
肠道和口腔细菌物种在肿瘤中普遍存在
- 使用Kraken和Bracken对807个RNA-Seq数据(non-human reads)进行表征。严格质控之后,保留了75个species(Figure 1A)
- 54个species(gut species)在肠道中prevalence高,20个(oral species)在口腔中更高(Figure 1B、C)【数据来源先前研究】
- 与健康供体(n = 568)相比,gut species的prevalence在CRC 患者(n = 284)的粪便样本中更高; 同样,CRC 患者(n = 24)的唾液样本中口腔类群更为普遍。
- 使用PathSeq进行验证。在 74 个species中, 43 个在 Pathseq 中具有等效。 Kraken 和 Pathseq 中所有 43 种疾病的流行率非常一致(Spearman Rho = 0.86,p = 2.2e-13;Figure 1C)
- 同样方法对587 个TCGA结肠和直肠样本分析( poly-(A) enrichment RNA-Seq)。 当应用用于 AVANT 的 250 reads阈值时,在 TCGA 中仅检测到 20 个物种。 将阈值降低到 5 个reads可检测出所有 74 个物种; 然而,在这个阈值下,样本中又识别出了 1,030 个物种,包括许多已知的污染物。 这是 Kraken 在 AVANT 中映射每个物种 1,289 ± 19,659(平均值 ± SD)读数而在 TCGA 中仅为 15 ± 183 的结果,因此很难可靠地区分信号和噪声。