检测基因表达水平差异的方法有哪些?

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基因的表达是dna-rna-蛋白,期间有转录水平调控、转录后调控、翻译后调控等多种调控机制影响该基因的表达.

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所以蛋白水平高低的原因就可能是多方面的.蛋白表达多,可能是mrna多,也可能mrna变化不大,而是翻译多了;蛋白表达少,原因亦然.

从2个水平检测一个基因的表达,可以更全面地了解该基因在该组织某个时期或某种条件下的变化受到什么水平的调控.

所谓基因表达,就是从dna到mrna再到蛋白的一个过程,基因表达水平一般是通过该基因转录的mrna的多少来衡量的.

每个基因转录产生的mrna的量,是受到时空等多种因素调控的,个体在不同的生长发育阶段,或者不同的组织水平,基因转录出mrna的量都是不一样的.

例如,当某种植物长期生长在高盐的环境里,该植物体内与抗盐相关的基因的表达量就会增加,以适应这种高盐环境,是植物能够生存下来,这时植物抗盐相关的基因表达水平就相对高

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检测基因表达的方法:

转录水平检测:rt-pcr,real-time pcr,northern blot

翻译水平检测:western blot

还有直接检测,如报告基因、融合荧光蛋白等。


rt-pcr是反转录pcr,是半定量方式。real-time pcr可以精确定量。 二者不同。后者为了区别于rt-pcr,一般不缩写。



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生物是很枯燥的呢

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