UK Biobank是目前世界上规模最大的人类遗传队列样本库,它收集了50万名来自英国40-69岁志愿者提供的共1500万份样本,旨在研究遗传因素、环境因素、生活习惯等与人类重大疾病的关联。
UK Biobank 为了保障样本库在建成后可以顺利投入运行,在建设之前即做了大量的调研工作,制定了非常明确的前处理和存储策略,并将相关成果发表在International Journal of Epidemiology上(<u>The UK Biobank sample handling and storage protocol for the collection, processing and archiving of human blood and urine</u>)。
虽然其策略仅限于血液和尿液样本,但其决策流程蕴含着非常清晰的逻辑,值得各类新建样本库借鉴。
- 哪些种类的样本可以支持我的研究目的?
如之前提及,UK Biobank其研究目的是寻找遗传因素、环境因素、生活习惯与重大疾病的关联。而一般健康的志愿者可以提供的样本种类包括了:血液、尿液、粪便、指甲、头发、唾液等。哪些样本可以提供有关遗传与环境因素的最全面信息?哪些样本最易收集且存储经济? UK Biobank进行了全面的考量(见下图),最终决定只存储血液和尿液;部分备选的样本种类被排除,如粪便难以收集,只能提供肠道菌群等较少信息且存储成本高昂。
- 样本以何种形式存储可以满足下游应用?
同一大类的样本仍存在不同的存储形式,如血液可以血清、血浆、白细胞层、红细胞、DMSO全血等细分形式进行存储,各个细分形式的下游应用不同。另外,不同的应用对样本数量的需求也不同。UK Biobank同样也对此进行了分析决策(见下图)。
- 选择合适的前处理和存储策略
由于存储目标已非常明确,我们只需寻找相应的前处理和存储方法来达到此目标即可。需要注意的是,不同的前处理方法及试剂的使用会对下游的应用造成很大的影响,如使用肝素钠作为抗凝剂的血液样本,可能会更适合作为代谢物检测的样本源,而并不适合作为DNA纯化及PCR的样本源。另外,不同的运输和存储温度均可能对下游应用产生影响,如用于复苏细胞的全血样本更适合在18度进行短期运输而非4度,且应全部在-140度以下进行长期保存;又如,行血液学检测的全血样本应在采集后立即使用,而不应在冻存后的再行检测。小编在这里借鉴了UK biobank的策略及其它的相关参考文件,整理出下表,供各位老师参考: