产品概述
本产品为艾美捷Bethyl Laboratories推出的用于定量检测大鼠血清、血浆及尿液中白蛋白（Albumin）浓度的夹心法ELISA试剂盒（货号：E111-125）。试剂盒采用预包被96孔板、生物素化检测抗体及链霉亲和素-HRP（SA-HRP）显色系统，检测范围为1.37 – 1000 ng/ml，适用于大鼠白蛋白的精确定量分析。该试剂盒在大鼠生理学、药代动力学、肾功能评估及相关疾病模型研究中具有广泛应用价值。
核心参数
参数 详细信息
靶标 大鼠白蛋白（Rat Albumin）
反应种属 大鼠
应用 ELISA
检测范围 1.37 – 1000 ng/ml
样本类型 血清、血浆、尿液
检测方法 生物素化-链霉亲和素-HRP
检测类型 夹心法ELISA
保存条件 2 - 8 °C
有效期 收货后6个月
试剂盒组分
组分 规格 数量
大鼠白蛋白预包被96孔板 96孔/板 1块
大鼠白蛋白标准品 1000 ng/瓶 2瓶
大鼠白蛋白检测抗体 12 ml 1瓶
20X 稀释缓冲液C 25 ml 1瓶
HRP溶液A 12 ml 1瓶
TMB底物液 12 ml 1瓶
终止液 12 ml 1瓶
20X 洗涤缓冲液 50 ml 1瓶
封板膜 — 6张
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（Sandwich ELISA）：
1. 包被：96孔板已预包被抗大鼠白蛋白捕获抗体。
2. 加样：将标准品或待测样本加入孔中，样本中的白蛋白与捕获抗体结合。
3. 检测：加入生物素化的大鼠白蛋白检测抗体，形成“捕获抗体-白蛋白-检测抗体”夹心复合物。
4. 酶联：加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶（HRP Solution A），与检测抗体上的生物素特异性结合。
5. 显色：加入TMB底物液，HRP催化底物产生蓝色产物；加入终止液后颜色变为黄色。
6. 读数：在450 nm波长处测定吸光度（OD值）。样本中的白蛋白浓度与OD值呈正比，通过标准曲线计算得出。
操作流程要点
样本准备
血清/血浆：按常规方法采集，避免溶血。建议适当稀释后检测（具体稀释倍数需预实验确定）。
尿液：可适当稀释后直接检测。
使用20X稀释缓冲液C配制1X工作液，用于标准品和样本的稀释。
洗涤液配制
将50 ml 20X洗涤缓冲液用去离子水或蒸馏水稀释至1000 ml（即1:20稀释），混匀备用。
标准曲线制备
标准品每瓶含1000 ng大鼠白蛋白。加入适量稀释缓冲液复溶，制备最高浓度标准品（1000 ng/ml）。
进行倍比稀释，至少制备6-8个标准点（如1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125、3.90625、1.953125、1.37 ng/ml）。建议设置零孔（稀释缓冲液空白）作为背景对照。
检测步骤（简述）
1. 将标准品和稀释后的样本加入预包被板孔中，每孔100 µl，覆盖封板膜，孵育（按试剂盒说明书推荐时间和温度，通常室温或37°C孵育1-2小时）。
2. 弃去孔内液体，每孔加入300 µl 1X洗涤液，洗板3-5次。
3. 加入检测抗体，每孔100 µl，孵育（通常30-60分钟）。
4. 洗板3-5次。
5. 加入HRP溶液A，每孔100 µl，孵育（通常30分钟）。
6. 洗板3-5次。
7. 加入TMB底物液，每孔100 µl，避光孵育（通常10-20分钟），直至标准品孔出现明显蓝色梯度。
8. 加入终止液，每孔100 µl，轻拍混匀。
9. 在450 nm波长处读取OD值（建议30分钟内完成）。
白蛋白是血清中最丰富的蛋白质，具有多项重要生理功能：
渗透压调节：通过与水分子结合，维持血浆胶体渗透压，调节血管内外水平衡。
物质运输：结合并运输脂肪酸、氨基酸、激素、胆红素、药物等多种疏水性或内源性化合物。
pH缓冲：作为两性电解质，参与血液pH的稳定。
在疾病状态下，白蛋白水平的变化具有临床指示意义：
肾损伤：尿白蛋白排泄增加（微量白蛋白尿）是肾小球滤过屏障受损的早期标志，用于糖尿病肾病、高血压肾损害等疾病的早期诊断。
肝功能不全：血清白蛋白降低提示肝脏合成功能障碍，常见于肝硬化、肝炎等。
营养不良/消耗性疾病：白蛋白可作为营养状态的评估指标。
本试剂盒检测范围覆盖1.37 – 1000 ng/ml，尤其适用于微量白蛋白尿的检测（通常定义：尿白蛋白排泄率30-300 mg/24h或尿白蛋白/肌酐比值30-300 µg/mg）。对于高浓度样本（如血清），需进行适当稀释以落入标准曲线范围内。
使用注意事项
1. 样本稀释：大鼠血清中白蛋白浓度极高（约30-50 mg/ml），直接检测远超试剂盒检测上限（1000 ng/ml）。建议先进行预实验确定最佳稀释倍数（通常需稀释1:50,000至1:200,000倍）。尿液样本根据实验目的可能需稀释或不稀释（检测微量白蛋白尿时可选用低稀释倍数）。
2. 避免交叉污染：使用一次性吸头，标准品和样本按顺序加样。洗板时确保每次洗涤液加满孔并充分吸干，不可出现干孔现象。
3. 显色控制：TMB显色时间需根据室温及酶活性适当调整。当最高浓度标准品孔显色达到深蓝色、背景空对照孔无明显蓝色时，应及时终止。
4. 检测波长：终止后的反应产物在450 nm处读取OD值。若使用双波长校正（450 nm减去570 nm或630 nm背景波长），可减少因板底瑕疵引起的误差。
5. 有效期：试剂盒自收货之日起2-8°C保存，有效期6个月。不同批次试剂组分不可混用。
6. 避免反复冻融：标准品复溶后建议按单次使用量分装保存于-20°C或-80°C，避免反复冻融导致蛋白降解。
