【海星第三代功能验证细胞库】
人肝癌细胞 (HepG2)
经非酒精性脂肪肝模型验证
STR只是起点，功能才是答案
【当98%的重复实验失败后，我们找到了颠覆细胞研究的终极答案】
全球首款功能验证细胞库如何为CNS级研究保驾护航
第八期：人肝癌细胞HepG2（经非酒精性脂肪肝模型验证）
海星第三代功能验证细胞库的人肝癌细胞 HepG2，经非酒精性脂肪肝（NAFLD）模型全程验证，每批次均提供脂质积累等量化数据，无论您是研究药物代谢、肝癌机制，还是探索代谢性疾病的分子奥秘，HepG2细胞都能为您提供稳定的实验支持。
HepG2细胞是一种来源于人肝细胞癌（HCC）的细胞系，广泛应用于以下研究领域：药物代谢与毒性研究、肝癌生物学研究、代谢性疾病研究、外泌体与细胞间通信研究、生物活性物质筛选。本实验通过油酸（OA）和棕榈酸（PA）联合诱导HepG2细胞，模拟肝脏脂质沉积，用于研究非酒精性脂肪肝（NAFLD）或脂代谢紊乱机制。
实验原理
油酸（OA）是一种单不饱和脂肪酸，较易被细胞代谢并酯化为甘油三酯（TG），从而促进脂滴形成并诱导相对温和的脂质积累，常用于模拟单纯性脂肪变性。
棕榈酸（PA）作为一种饱和脂肪酸，更易诱发脂毒性，可导致内质网应激、氧化应激以及炎症反应（例如通过激活JNK和NF-κB信号通路），进而可能引起细胞凋亡或更严重的肝损伤。
将OA与PA联合使用（例如400 μM OA + 200 μM PA），可同时模拟脂质积累与脂毒性效应，广泛应用于构建NAFLD的复杂病理模型。
检测与鉴定
油红O染色：诱导组脂滴面积占比＞30%（对照组＜5%）。
实验结果：油红O染色显示，诱导组（OA 400 μM + PA 200 μM）细胞质内出现大量红色脂滴（面积占比＞30%），显著高于对照组（＜5%）。该细胞适用于探究脂代谢相关基因/药物作用靶点。可作为NAFLD治疗药物的体外评价模型。
技术护航：从细胞到数据，全程无忧
1. NAFLD 模型特征稳定且可量化
通过油酸（OA）和棕榈酸（PA）联合诱导 HepG2 细胞，模拟肝脏脂质沉积，用于研究非酒精性脂肪肝（NAFLD）或脂代谢紊乱机制。油红 O 染色显示，诱导组细胞质内出现大量红色脂滴显著高于对照组。该细胞适用于探究脂代谢相关基因/药物作用靶点，可作为 NAFLD 治疗药物的体外评价模型。
2. 培养操作便捷，适用范围广
· 贴壁生长特性好，传代与冻存流程简单，普通实验室即可开展。
· 兼容基因编辑、3D 培养、高通量筛选等技术，可用于机制研究、药物筛选、毒性评估等多个场景。
3. 成本可控，性价比突出
· 可长期传代培养，无需频繁取材，相较于原代肝细胞大幅降低实验成本。
· 模型构建周期短，48-72 小时即可完成诱导，适合大规模药物筛选与批量实验。
4. 交付与使用体验优质
采用德国纳米技术干冰桶运输，搭配详细实验手册与完整验证报告；细胞培养操作便捷，复苏活率＞80%，无需额外优化即可开展极化实验，大幅降低科研时间成本。
核心应用场景
1. 非酒精性脂肪肝（NAFLD）及相关肝病机制研究
· 探索脂质代谢紊乱、氧化应激、炎症反应的分子通路。
· 研究 NAFLD 向非酒精性脂肪性肝炎（NASH）、肝纤维化甚至肝癌进展的机制。
2. 保肝降脂药物与活性物筛选
· 用于天然产物、小分子化合物、益生菌等的体外功效验证。
· 评估候选药物减少脂质沉积、降低炎症因子、改善肝细胞损伤的作用。
3. 肝毒性与安全性评价
· 检测药物、食品添加剂、工业化学品等对肝细胞的脂质毒性。
· 分析化合物诱导肝脂肪变性的风险，为临床前安全性评估提供数据。
4. 基因功能与信号通路研究
· 通过过表达或沉默特定基因，验证其在脂质代谢、炎症调控中的作用。
· 解析 AMPK、PPARγ、NF-κB 等关键信号通路在 NAFLD 中的调控机制。
5. 细胞模型优化与 3D 培养应用
· 用于构建更接近体内环境的 3D 肝球模型，提升实验结果的临床转化价值。
· 结合类器官技术，开展个性化肝病治疗的相关研究。
HepG2(经非酒精性脂肪肝模型验证)培养要点
1. HepG2细胞的生长特点就是呈岛状生长，并且岛状生长的细胞扩张能力有限，长到一定大小之后就会堆积生长。
2. 要想细胞分散均匀，一方面是需要保证细胞消化过程中分散良好，另外一方面接种的初始密度不宜过低，否则就会有大面积的空白区域。
3. 另外如果实验需要HepG2为分散良好的单层细胞，可以用多聚赖氨酸包被培养瓶后培养，细胞将会呈单层分散的形式生长，但是形态跟不包被时差异比较大，会变成长梭形细胞。
4. HepG2细胞复苏或传代后会有少部分的细胞贴壁和部分悬浮的细胞，复苏两天后细胞会从贴壁细胞向外开始生长。在生长过程中，细胞会在贴壁细胞的上方生长，形成不同的细胞层。
5. 在细胞复苏的一周内，培养瓶中会有悬浮的活细胞团，在换液过程中不要丢弃这些活的悬浮细胞，可以通过离心（125×g）回收细胞，重新接种到培养瓶中，分离或者丢弃漂浮的活细胞会使细胞数量变少，引起细胞的停滞生长或细胞死亡。
6. 培养条件的细微变化，尤其是pH和培养基中血清的质量，可能会影响细胞的生长状况，在细胞的生长过程中会有细胞内的液泡出现，特别在细胞快要融合是会出现这种情况。培养细胞时使用未被灭活的高质量、低内毒素的胎牛血清，可以使细胞更好的贴壁和形成单层细胞。细胞在生长过程中可以通过将血清浓度提到到20%来改善细胞生长缓慢的情况。
技术服务:CRISPR/Cas9细胞基因编辑、CRISPR文库筛选/文库病毒/载体构建、分子诊断参考品/突变基因参考品/融合基因参考品、细胞稳转 / 细胞干扰
细胞试剂:HyCyte®干细胞/原代细胞/细胞株、三系诱导培养试剂、细胞专用培养基、基因编辑试剂盒、病毒现货、预筛选胎牛血清
