生信学习Day4笔记--测序--周晓飞

Day4主要了解测序相关知识(好快呀,时间过去一半啦)

一、区分一二三代测序

  1. 一代Sanger(HGP)
    缺点很明显,看人类基因组计划就知道,成本高、通量低
  2. 二代NGS(罗454、Illumina、ABI SOLiD平台)
    优点:成本低、速度快、准确
    缺点:读长短、拼接困难、pcr扩增错误高
  3. 三代SMRT和纳米孔单分子测序
    优点:pcr无需扩增、超长读长
    缺点: pcr错误率高

二、NGS组学分类

1. 基因组学

测序分类
WGS全基因组测序(就是结构基因组学)
WES全外显子组测序
RRGS简化基因组测序
RAD-Seq
GBS
2bRAD
ddGBS(ddRAD)
基因组测序作用真的很牛了
作图(遗传、物理、转录本图谱)
核苷酸序列分析
Gene定位
基因功能分析

2. 转录组学(基因表达分析)

测序分类
mRNA-Seq
InRNA-Seq
sRNA-Seq(miRNA-Seq)
测序作用
获得转录本信息
发现新的基因
基因结构优化
发现可变剪切
发现基因融合
基因表达差异分析

3. 蛋白质组学(很火很火)

蛋白质组数据处理、蛋白及其修饰鉴定
构建蛋白质数据库、相关软件的开发和应用
蛋白质结构功能预测
蛋白质连锁图

4. 代谢组学(基本不懂,想了解怎么分析)

代谢物指纹分析
代谢轮廓分析

三、二代测序流程

DNA文库构建(磷酸化、加A,加特定Adaptor等)
簇的生成--桥式PCR
测序(三个平台)
数据产出

四、三代测序原理(呃。。有点复杂,好好消化)

SMRT:边合成边测序,有荧光标记碱基
纳米孔单分子测序:加电压下,碱基引起电流变化,进而检测碱基序列(复杂!)
后面的我就选修了,毕竟明天开组会。。。最后总结一下吧~


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