1. 细胞状态直接影响着分化潜力，有以下三点，需要留意：
(1) 该细胞生长速度快（倍增时间：~20小时），容易分化，建议密度达70%时传代；
(2) 不要让细胞长得太满甚至开始融合，影响后续成肌分化率；
(3) 细胞消化完全后再吹打混匀，不要用枪头把没有消化好的细胞吹下来，以免细胞成团。
2. 待细胞生长至汇合度为80%左右时，即可进行诱导分化。具体步骤如下:
(1) 丢弃旧培养基，用PBS清洗两次；
(2) 换分化培养基（DMEM-H+2%马血清+1% P/S）诱导，然后置于CO2恒温培养箱中进行培养；
(3) 每24h换液一次，在显微镜下观察细胞形态和生长状况。诱导分化成功时，可以看见肌管表现为厚的管状结构，有时为多核。
注意事项
(1) 细胞代数不要太高；
(2) 成肌分化过程中会有少量细胞凋亡，属于正常现象。
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严格质控：通过ISO 9001认证，支原体检测阴性，确保实验安全。
