核酸修饰酶——热稳定多聚核苷酸激酶(ET PNKnase)
大家所熟知的T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)能够催化ATP的 γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5'-羟基末端以及3'-单磷酸核苷上,来实现DNA/RNA的末端磷酸化或末端标记。而极耐热多聚核苷酸激酶(ET PNKnase)可极度耐热,功能保持与T4 PNK一致,在95°C加热30min后仍然保持全部活性。该酶工作温度范围50~95°C,温度低于65°C时酶活力下降较多,在75-95℃条件下具有同等的酶活力。这种独有的特性,使得含有高度结构、高度复杂的核酸底物,以及需要极端条件下的实验得以开展。该酶具有5'磷酸激酶活性,无3'磷酸激酶和磷酸酶活性。
该酶应用广泛,如:含有高度复杂结构DNA或RNA 5´末端的磷酸化反应和一步法高温条件下DNA/RNA磷酸化与连接反应。
实例:

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