集美们，集帅们，小源课堂开课啦~

微波炉，有吧？锥形瓶、电子天平，有吧？小小琼脂糖凝胶，拿捏！

接下来，小源将在配制步骤、注意事项以及小技巧等几个方面来阐述：

一、配制步骤

1、安装制胶器

将制胶底板放在水平工作台上，安装制胶底板，插上样品梳；

2、凝胶浓度的选择

根据需电泳的DNA样品分子大小，参考下表：

3、琼脂糖凝胶制备

根据所需的凝胶浓度，称取对应重量的琼脂糖粉加入锥形瓶中，并加入相应体积的1x TAE或1X TBE缓冲液，在微波炉中加热至琼脂糖粉末完全溶解即可（以1%的浓度为例，1g琼脂糖粉末应加入到100ml的1X缓冲溶液中）；

4、灌胶

待步骤3的琼脂糖溶液冷却，温度45~60℃时，将其倒入烧杯中并加入核酸染料混匀后，倒入已安装好的制胶器中（核酸染料的用量请根据使用说明加入），待凝胶完全冷却凝固后即可使用。

二、注意事项

1、安装制胶器时，制胶底板要与制胶器紧贴，防止灌胶时琼脂糖溶液流入制胶底板与制胶器的缝隙中；另外样品梳安装时，要确保两端都完全卡入制胶器的卡槽，避免样品孔深浅不一；

2、在琼脂糖溶液加热时过程中，要防止溶液沸腾过度；操作时请戴上放热手套；

3、灌胶操作过程中，尽量将琼脂糖溶液轻轻倒入制胶器中，避免产生大量气泡；灌胶完成后，检查是否有气泡在样品梳孔附近；

4、凝胶冷却凝固需要30min~1h左右的时间，完全凝固前，不要随意挪动制胶器或拔走样品梳；

二、琼脂凝胶配置小技巧

1、琼脂糖试剂用完后，瓶盖不要丢，留着有大用：

可将其盖在锥形瓶上，在琼脂糖溶液加热过程中，可减少因沸腾而蒸发的缓冲溶液体积；

2、缓冲溶液不吝啬：

由于加热过程中，会蒸发一定体积的缓冲溶液，所以在制备时，可适当多加入5%~10%体积的缓冲溶液，避免蒸发后琼脂糖溶液体积减少，导致最终凝胶厚度不满足于实验；

3、想要制胶快，就要多动手：

在加热过程中，可以多次暂停微波炉，拿出锥形瓶小心摇动，使琼脂糖粉末与缓冲溶液充分接触，加快溶解；

以上就是配置琼脂凝胶的相关步骤与注意事项啦！还有什么疑问，欢迎提出在评论区和小源交流噢！