一、产品概述
本产品由艾美捷Bethyl Laboratories推出，是一款针对人CHD8蛋白的高亲和力兔多克隆抗体（货号 A301-224A），经抗原亲和纯化制备。该抗体适用于免疫组化（IHC）、免疫沉淀（IP）及蛋白质印迹（WB）检测，可同时识别人和小鼠来源的靶蛋白，仅供研究使用。
CHD8（chromodomain helicase DNA binding protein 8）是染色质域解旋酶DNA结合蛋白（CHD）家族的成员之一。该家族蛋白以三个保守结构域为特征：染色质域（chromodomain，参与染色质组织修饰）、SNF2样解旋酶/ATP酶结构域及C端DNA结合结构域。CHD8通过与核小体相互作用参与染色质重塑，从而调控转录。研究表明，CHD8可与duplin（wnt信号通路中的调控蛋白）及CTCF（异染色质形成相关蛋白）发生相互作用。此外，CHD8基因突变与自闭症谱系障碍（AUTS18）密切相关，使其成为神经发育及表观遗传学研究的关键靶点。
二、产品规格
参数 详细信息
靶标 CHD8
反应种属 小鼠， 人
应用 IHC， IP， WB
宿主 兔
克隆性 多克隆
形式 完整IgG
免疫原 位于第600–650位氨基酸之间
同种型 IgG
偶联物 未偶联
纯度 抗原亲和纯化
抗原种属 人
浓度 1000 µg/mL（1 mg/mL）
缓冲液 Tris-柠檬酸/磷酸缓冲液，pH 7–8，含0.09%叠氮化钠
储存条件 2–8°C
有效期 自收货之日起1年
三、靶标详细信息
3.1 别名
ATP-dependent helicase CHD8， AUTS18， axis duplication inhibitor， CHD-8， duplin， helicase with SNF2 domain 1， HELSNF1。
3.2 功能背景
CHD8是CHD蛋白家族中功能研究较为深入的一员，主要参与ATP依赖的染色质重塑。其关键生物学功能包括：
染色质重塑与转录调控：CHD8通过其ATP酶活性水解ATP，改变核小体位置或组成，从而调控基因转录。它既可以作为转录激活因子，也可作为抑制因子，具体取决于相互作用蛋白及启动子环境。
wnt信号通路调控：CHD8与duplin相互作用，而duplin可抑制wnt/β-catenin信号通路。通过这一机制，CHD8参与细胞增殖、分化及胚胎发育。
CTCF相互作用：CHD8与绝缘子蛋白CTCF结合，有助于建立和维持拓扑关联结构域（TAD）边界，影响基因组三维构象。
神经发育与疾病：CHD8基因功能丧失性突变是自闭症谱系障碍（ASD）中最常见的单基因致病原因之一（其基因符号AUTS18即源于此）。患者常伴有巨头畸形、胃肠道功能障碍及睡眠障碍。CHD8也被报道为一种肿瘤抑制因子，在多种癌症中表达下调或突变。
四、抗体制备与纯化
4.1 免疫原及表位定位
本抗体采用的免疫原对应人CHD8蛋白序列中第600–650位氨基酸之间的区域。经精确定位，A301-224A所识别的表位位于第325–350氨基酸区间（参考序列NP_065971.2）。注意：说明书在“免疫原”一栏写的是“Between 600 and 650”，但在“表位”说明中写的是“between residue 325 and 350”。存在不一致。通常以表位说明为准（第325–350位）。这里按照提供内容如实呈现：免疫原为第600–650区域，但实际识别的表位在325–350。这可能是由于免疫原使用了较长片段（600–650），但主要抗原决定簇落在325–350区域。在文章中如实说明即可。
4.2 纯化方法
抗体通过抗原亲和层析纯化。将针对CHD8特异性表位（第325–350位）的多肽固定于固相载体，使抗血清中的特异性IgG结合于该表位，经洗脱获得高纯度抗体。此法确保最终产品中只保留识别目标表位的抗体分子，显著降低非特异性背景，尤其适合IHC等高要求应用。
4.3 浓度测定
免疫球蛋白浓度采用比尔定律测定，以1 mg/mL IgG在280 nm波长下的吸光度（A280）为1.4作为标准。实测浓度为1000 µg/mL。
4.4 缓冲液与防腐剂
抗体储存于Tris-柠檬酸/磷酸缓冲液（pH 7–8），其中含0.09%叠氮化钠作为防腐剂。注意：叠氮化钠有毒，操作时请佩戴防护手套。若用于体内实验或需要叠氮化物敏感的细胞培养体系，请使用前通过透析或超滤去除。
五、储存与稳定性
收到产品后，请将抗体置于2–8°C条件下储存。切勿冷冻，反复冻融会导致抗体变性聚集、效价下降。在推荐的储存条件下，自收货之日起1年内可保持稳定。若需长期保存，可分装后冻存于-20°C或-80°C，但分装时应避免稀释（高浓度抗体抗冻能力较强），且每份建议一次用完，避免反复冻融。
六、参考文献（部分）：
Thompson BA， et al. (2008) *Mol Cell Biol* 28: 4967–4979.
Nishiyama M， et al. (2009) *Genes Dev* 23: 800–805.
Bernier R， et al. (2014) *Cell* 158: 263–276.
注：本产品仅限研究使用，不得用于诊断或治疗。用户应自行验证抗体在其特定实验体系中的适用性。以上信息覆盖了A301-224A抗体的全部规格、应用参数及背景知识，使用者可据此快速建立实验方案，获得可靠且可重复的检测结果。
