文献阅读:Recent advances in single extracellular vesicle detection methods

文献信息

标题:Recent advances in single extracellular vesicle detection methods

DOI(url): Recent advances in single extracellular vesicle detection methods - ScienceDirect

日期及杂志:2020 Apr 15, Biosens Bioelectron

作者及单位:Wang S, College of Life Science, Yangtze University, Jingzhou, 434025, China

文献概述(这篇文献的结论是什么?)

本文是一篇关于单细胞外囊泡(SEVs)检测技术最新进展的综述。广义上,SEV检测方法可以分成两类,标记法非标记法。标记法主要通过标记抗体或适配体来检测SEV的表面蛋白,或通过分子信标检测EV内的miRNA,而非标记法通常分析物理特性如颗粒大小和浓度,以及分析SEV的结构,识别其脂质、蛋白质和核酸等成分。本文综述了这些SEV检测方法的最新研究进展、优缺点和应用。

表1.标记法总结

标记法.png

表2.非标记法总结

非标记法.png

文章亮点(这篇文献的优点在哪?)

  • 文章全面介绍了用于检测单个细胞外囊泡的各种标记和非标记方法,涵盖了多种检测技术,并客观评估了不同SEV检测技术的优缺点,提供了对大部分技术的优势和局限性的了解,同时引用了大量的研究和参考文献,阐述了各类SEV检测技术的应用,揭示了SEV在细胞通讯、靶向药物传递等方面的潜在应用,体现出SEV所具有的研究价值。

我的疑问(这篇文献的不足在哪?)

  • 我的问题:对于检测方面的知识较为缺乏,对于检测方法的具体细节、原理没办法全部深刻掌握,只着重看了PBA的部分

和我相关(我从这篇文献里学到了什么?)

  • 根据这篇综述,大部分的标记法SEV检测技术都具有高灵敏度、高特异性,可实现对SEV表面蛋白的特异性检测,SEV检测技术在异质性研究和生物标记识别方面具有较高的潜力,同时可以基于膜蛋白分选特定的EV亚群进行更加深入的研究,具有十分广阔的研究价值。

  • 做下游分析时,了解上游检测原理非常重要。PBA技术。

    准备:

    1. 带有ProteinTag和MoleculeTag核苷酸与抗体化学偶联来制备PBA探针

    2. 将带有ComplexTag的环状核苷酸滚环扩增(RCA)得到RCA产物

    原理:

    1. PBA探针与外泌体结合

    2. 通过PBA探针被CTB在微滴孔中捕获

    3. 加入RCA产物杂交并进行PBA探针的退火

    4. PBA探针与RCA产物反向互补结合

    5. PCR以及测序

    其中一个ComplexTag表示一个外泌体,MoleculeTag表示UMI,ProteinTag表示外泌体膜蛋白

相关文献(文献扩展,其他补充资料)

Wu, D., Yan, J., Shen, X. et al. Profiling surface proteins on individual exosomes using a proximity barcoding assay. Nat Commun 10, 3854 (2019). https://doi.org/10.1038/s41467-019-11486-1

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