细胞原本状态很好，换液和传代几次后，出现细胞背景不干净，出现细胞凋亡残留的细胞碎片，细胞变小，逐步细胞都死亡了，求大神分析什么原理。
分析可能原因：
1.4T1细胞对PH较为敏感，长期不换液??本人换液周期为24h
2.传代消化过度??
还有就是4T1细胞养着养着，消化时不愿意下来，而且随着时间增加越难从壁上消化下来，导致每个细胞消化的时间都不一样，且壁上残留一些未消化下来的细胞，求大神们有什么好的消化方法，既能消化下来，又不会消化过度么?
【参考答案】
你的细胞容易抱团可能是因为你之前消化过头了，你可以试着将胰酶溶液稀释，通常我们用的胰酶浓度是0.25%。胰酶消化5min似乎太久了。
