AAV面静脉注射新生小鼠的具体操作

对于成年小鼠来说,通过尾静脉注射是比较简单的注射方式,但如果实验动物模型为新生小鼠,那么面静脉可能是更加合适的注射位点。

1. 将新生小鼠放在预冷的纸巾上 30-60s, 进行麻醉 ; 或: 在纸巾上滴加 0.5 mL 异氟烷,并将纸巾放入50 mL 的锥形管中,拧紧瓶盖,静置 1 min。将锥形管水平放置后放入小鼠,拧紧瓶盖,待小鼠完全停止活动后将其拿出;

注:避免新生小鼠直接接触冰块或麻醉时间过长以致小鼠死亡。

2. 用拇指和食指 ( 非惯用手 ) 按住小鼠,轻轻舒展注射部位的皮肤,使面部静脉清晰可见(图 A), 避免对小鼠施加过大压力;

3. 用酒精棉片对注射部位进行消毒处理;

4. 将 0.3mL 31G 注射器置于颞浅静脉上方,针头与面部保持约 10°角,将针尖部分插入静脉后

调整针头角度至 0-5°角,再轻轻插入静脉管约3mm,缓慢注入 25-50 μL 病毒悬液(图 B);

5. 等待 5s,缓慢抽出针头,立即用纱布按压止血。 注射部位若出现黑色斑点则代表注射成功 ( 图 C);

6. 确保小鼠的体温和体色恢复正常,用 70% 的乙醇浸湿纸巾后轻轻擦拭小鼠(图 D),再用使用

过的鼠垫将其擦拭一遍,以去除外来气味,避免小鼠被排斥(图 E);

7. 使用加热垫帮助小鼠恢复,用 70% 乙醇浸湿过的纸巾擦拭母鼠鼻子后将小鼠放回笼中 ( 图 F)。

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