学习内容

-怎么区分一二三代测序

-二代测序大体流程

-NGS组学都包括哪些分类（粗略）

-必备名词

flowcell： 测序反应的载体/容器，1个flowcell有8个lane

lane： 测序反应的平行泳道，试剂添加、洗脱等过程的发生位置

tile： 每次荧光扫描的位置，肉眼是看不到的

双端测序： 可能序列比较长有四五百bp，两边各测120-150bp

junction： 双端测序中间一些没有测到的区域

flowcell构造：一个lane包含两列（swath），每一列有60个tile，每个tile会种下不同的cluster，每个tile在一次循环中会拍照4次（每个碱基一次）

-边合成边测序（sequence by synthesis, SBS）～合成

区分一二三代测序

生信星球

二代测序大体流程

1.DNA文库构建

将基因组DNA随机片段化，然后通过末端修复、磷酸化、加A等步骤修补成平末端，最后加上特定的接头（Adaptor），构建成DNA文库。

2.簇的生成——桥式PCR

Flowcel上面连有两种接头（P5、P7），当DNA经变性后流经Flowcell时，利用Flowcell上的接头与DNA两端的接头相互匹配。DNA进行桥式PCR扩增，从而将碱基信号放大。通过桥式PCR不断循环获得上百万条成簇分布的双链待测片段。

3.测序

4.数据产出

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