荧光原位杂交技术FISH发展趋势

荧光原位杂交(Fluorescence In Situ Hybridization, FISH)技术问世于20世纪70年代后期,其基本原理是利用标记了荧光素的核酸作为探针,按照碱基互补原则,与待检样本中与之互补的核酸经过变性-退火而形成杂交双链核酸,通过荧光显微镜进行检测和分析。是一种在细胞遗传学水平上检测染色体及基因数目以及结构异常的一种分子生物学技术。该技术具有快速、安全、灵敏度高、探针可长期保存的特点,已广泛地应用于细胞遗传学、肿瘤学生物学、基因定位、基因作图、基因扩增、产前诊断等不同领域。

FISH选用的标本既可以是分裂细胞也可以是间期细胞。近年来,随着FISH所应用的探针种类的不断增多,如DAPI /GFP/FITC/PI/Texas-Red等,使得普通的宽场荧光显微镜即可获得高质量的FISH信号。若采用多种方法标记DNA探针,故一次杂交可以同时观察多个探针的信号,使用数字成像系统(CCD/CMOS),分别多次摄取的信号储存在计算机内,通过软件系统的处理,最终形成一个复合的多颜色的图像。

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