人多巴胺（DA）定量检测试剂盒（ELISA）能够对血清、血浆、细胞培养上清液、组织中人多巴胺（DA）的含量进行定量检测。在使用该试剂盒前，请务必仔细阅读说明书。需要注意的是，本试剂盒仅供科研使用，不得用于临床诊断。
实验原理方面，试剂盒采用酶联免疫分析方法。通过生物素标记多巴胺（DA），纯化的抗多巴胺（DA）抗体包被微孔板，在竞争抑制反应中，一定量的固相抗体与生物素标记多巴胺（DA）及非标记抗原（校准品或标本）进行抑制竞争反应。抗体与生物素标记的多巴胺（DA）结合量受非标记抗原量所抑制，非标记抗原量多，抗体与生物素标记的多巴胺（DA）结合就少，反之结合就多。反应平衡后，形成固相抗体 - 生物素化 Syndecan-4，再加入酶标记的亲和素，形成固相抗体 - 生物素化多巴胺（DA）- 酶标 - 亲合素复合物。经加底物显色后，用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值）。随着多巴胺（DA）浓度的升高，OD 值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点，对血清中多巴胺（DA）的减少或升高有可靠的检出性能。
试剂盒存在一定的限制性，比如仅供科研使用，不得用于临床诊断；需在试剂盒标示的有效期内使用，过期产品不得使用；不能与其他厂家的试剂盒或者组分混用；样品需要稀释时可用 PBS（PH7.4) 稀释；若样本值高于最高标准品浓度值，应将样本适当稀释后重新测定；待测样本中可能存在的异嗜抗体会干扰检测结果，检测前需排除该因素；通过其他方法得到的检测结果，与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。
技术提示方面，混合蛋白溶液时要避免起泡；加校准品与样本时，每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头，公共组分应该悬臂加样，避免交叉污染；合适的温育时间和充分的洗涤步骤是保证实验结果准确性的必要条件；使用自动洗板机时，加入一个 30 秒浸泡的步骤，可提高检测精度；底物溶液为无色液体，保存过程中变为蓝色代表底物溶液已经失效，不得使用；终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致，加入终止液后，蓝色底物产物会瞬间变为黄色；实验中，用剩的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存；所有液体组分使用前充分摇匀，严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温育操作。
试剂盒组分与保存方面，未开封的试剂盒保存在 2-8 度，不得使用过期试剂盒。其组分包括校准品、包被微孔板、HRP 标记抗体、生物素化抗原、底物液 A、底物液 B、终止液、稀释液等。校准品浓度依次为：120、60、30、15、7.5、0nmol/L。本品必须按照具有潜在的感染性进行处理，处理过程应当遵循通用的安全措施。
其他用品包括酶标仪（450nm）、精密移液器及一次性吸头、蒸馏水、洗瓶或者自动洗板机、37℃水浴锅或恒温箱、500ml 量筒。
生物安全方面，检测必须符合实验室管理规范的规定，严格防止交叉污染，所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按照传染物进行处置。试剂盒的液体组分中，含有 proclin-300 防腐剂，可能引起皮肤过敏反应，避免吸入烟雾与皮肤接触。底物液对皮肤、眼睛和上呼吸道有刺激作用，避免吸入烟雾。实验时应戴上防护手套，实验完成后彻底洗手。
样品的采集和储存方面，样本类型包括细胞培养上清、血清、血浆、组织等。采集过程中不得使用叠氮钠做为防腐剂。样本在 2-8℃条件下，可以储存 72h，或者在 - 20℃储存 6 个月。样本收集后，若不是一次检测完，应按一次用量分装冻存，避免反复冻融，使用时在室温下解冻，确保样品均匀充分解冻。
检验方法操作程序为：将各种试剂移至室温平衡两小时，取浓缩洗涤液用蒸馏水 1：20 稀释备用；将预包被板从密封袋中取出，设空白对照孔，加入对应校准品和待测血清或质控品；除空白孔外所有孔加入生物素化抗原，置 37℃温育 60 分钟；手工或洗板机洗板；每孔加入酶标亲合素，置 37℃温育 30 分钟；再次手工或洗板机洗板；每孔加显色剂 A 和 B，振荡混匀后，置 37℃避光显色 15 分钟，每孔加终止液。用酶标仪读数，取波长 450nm，先用空白对照孔调零点，然后测定各孔光密度值（OD 值）。
结果计算方面，检测完成后，以标准品浓度做为纵坐标，对应的吸光度（OD 值）作为横坐标，利用计算机软件，采用四参数 Logistic 曲线拟合（4-pl），创建标准曲线方程，通过样本的吸光度（OD 值），利用方程计算样品的浓度值。若样品被稀释，通过上述方法测的的浓度值，要乘以稀释倍数，才是样品的最终浓度。
试剂盒性能指标包括物理性能、剂量反应曲线线性、精密度、灵敏度、回收率、稳定性和检测范围等。物理性能要求液体组分应澄清，无沉淀或絮状物，所有组分应无包装破损，各组分装量不少于组分表中要求。剂量 - 反应曲线相关系数（r）的绝对值应不低于 0.9900。批内和批间变异系数 CV% 小于 15%。最低检出限应不高于 0.1nmol/L。回收率在 85%-115% 之间。试剂盒在 2℃-8℃保存，有效期 6 个月，检测范围为 7.5 nmol/L – 120 nmol/L 。
