在适应性免疫的精密调控网络中，辅助性T细胞2（Th2）作为CD4+T细胞的另一关键亚群，主导着针对细胞外寄生虫的防御体系，同时也是过敏性疾病的核心调控者。无论是研究哮喘、特应性皮炎等过敏性疾病，探索抗寄生虫免疫机制，还是开发新型免疫疗法，掌握体外Th2细胞极化技术都至关重要！
第一部分：理论基石——Th2细胞的身份档案
Th2细胞是什么？
Th2细胞是专门负责体液免疫应答的核心协调者，其特征性表现为分泌IL-4、IL-5和IL-13等细胞因子。它们是过敏免疫的"总工程师"，通过精密调控抗体类别转换和嗜酸性粒细胞应答，建立起针对寄生虫感染的防御网络，同时也成为过敏性疾病的关键驱动力量。
为什么要进行体外Th2极化？
机制解码：深入解析IL-4/STAT6信号通路在Th2分化中的核心作用
疾病建模：获得功能性Th2细胞，用于构建哮喘、特应性皮炎等过敏性疾病模型
疗法开发：为过敏性疾病靶向治疗和免疫调节策略提供实验基础
第二部分：核心武器库——极化因子全解析
Th2分化的分子机制已被充分阐明，其极化条件建立在对关键信号通路的精确调控基础上。
"经典双信号"通路：
TCR激活信号：通过抗CD3/CD28抗体提供T细胞活化必需的第一信号
IL-4/STAT6核心通路：IL-4通过激活STAT6，诱导关键转录因子GATA3表达，这是Th2分化的决定性信号
强化信号组合：
IL-2协同作用：作为T细胞生长因子，增强细胞增殖和分化效率
抗体阻断策略：使用抗IFN-γ和抗IL-12抗体，消除Th1分化干扰，确保极化纯度
第三部分：实战操作篇——人Th2极化方案
1.细胞培养
用5 µg/ml anti-human CD3 mAb包被96孔细胞培养板过夜，第二天洗板封闭后加入用CD4 Nanobeads, human（S0B5740）分选后的CD4+ T细胞，培养基用RPMI-1640 加200U /mL IL-2, 30 ng/ml IL-4, 10 µg/mL Anti-Human IFN-γ, 55 μM β-巯基乙醇，1 µg/ml anti-human CD28 mAb及10 % FBS培养;
48 小时开始每 12 小时观测细胞浓度，如果细胞密度很大，则将细胞分到新的孔中，并加以上培养液刺激（不用添加CD3,CD28抗体刺激）;
培养5天后收集细胞细胞，将胞密度控制为10⁶/ml，用10ng/ml PMA+1μg/ml Ionomycin，10μg/ml Brefeldin A共处理5h。
阴性对照组Th0细胞:用5 µg/ml anti-human CD3 mAb包被96孔细胞培养板过夜，第二天洗板封闭后加入分选后的CD4+ T细胞, 培养基用RPMI-1640 加 10 % FBS, 55 μM β巯基乙醇, 10μg/mL Anti-human IL-4, 10μg/mL Anti-Human IFN-γ, 200U/ml IL-2 , 1 µg/ml anti-human CD28 mAb培养;
48 小时开始每 12 小时观测细胞浓度，如果细胞密度很大，则将细胞分到新的孔中，并加以上培养液刺激（不用添加CD3,CD28抗体刺激）培养5天。
2、流式检测
收集细胞后用流式检测抗体染色上机 抗体货号500831 PE/Dazzle™ 594 anti-human IL-4 Antibody
Th2 Polarization Kit, Human /人Th2极化套装_UA090018_优爱(UA BIOSCIENCE)官网
免责声明： 本文提供的方案为通用参考指南，具体实验条件请根据自身实验体系行优化。
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