NCBI网站找到target gene 的CDS区域

• 第一步：打开菜单栏，下拉到Gene，在搜索框输入目标基因GSTP1，然后进行Search

  
  
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• 第二步：在Search后出现的页面里有很多种动物的基因，找到人的种属，单击进行查找

  
  
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• 第三步：新出现的页面是目标基因GSTP1的介绍，下滑到核苷酸序列，点击GenBank模式查找其基因序列

  
  
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• 第五步：最后保存我们查找到的序列，如图进行修改后，点击Create File Button就可以进行下一步分析了。

  
  
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网站设计sgRNA序列：

• 网站有很多，这里只介绍zhanglab的一个网站：

  
  
  点击：CRISPOR
  
  
  输入序列-选择物种和crispr种类

sgRNA设计对比（spcas9为例）

spcas9-sgRNA设计示意图1

spcas9-sgRNA设计示意图2

cas9原理介绍

• types of cas9

  
  
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• spcas9 示意图

  
  
  Wikipedia