1933 年，日本侵略者的铁蹄无情地践踏着中国东北大地，在这片广袤的黑土地上，一支代号为 “” 的秘密部队悄然组建。他们选址哈尔滨平房区，开始构建一座阴森恐怖的人间炼狱 —— 细菌实验基地。 部队打着 “防疫给水” 的幌子，实际上却在进行着惨无人道、灭绝人性的细菌实验，将无数鲜活的生命当作实验品，犯下了罄竹难书的反人类罪行。
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影片的故事围绕着一群陷入这场人间悲剧的小人物展开。王永章（姜武 饰）本是一位朴实憨厚的东北农民，过着平凡而安稳的日子，与家人尽享天伦之乐。然而，命运的齿轮却无情地将他卷入了这场黑暗漩涡。日军的一次扫荡，打破了他生活的宁静，家人惨遭杀害，村庄被付之一炬。怀着满腔的悲愤与仇恨，王永章踏上了复仇之路。机缘巧合下，他听闻了 部队的罪恶行径，决定深入虎穴，寻找机会揭露并摧毁这个恶魔巢穴。他佯装成一名渴望赚钱糊口的劳工，成功混入了 部队的基地。
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在基地中，王永章目睹了一幕幕令人毛骨悚然的场景。一间间冰冷的实验室里，摆放着各种冰冷而血腥的实验器械。“马路大” 们，这些被日军当作实验材料的无辜百姓，包括中国人、苏联人、朝鲜人等，被残忍地关押在狭小的牢房中，眼神中充满了恐惧与绝望。他们被强行拉去进行各种可怕的实验，如冻伤实验，在零下几十度的极寒环境中，日军将实验者的手脚暴露在外，观察肢体被冻伤、坏死的过程；细菌炸弹测试，将实验者放置在特定区域，引爆携带细菌的炸弹，看着他们在痛苦中挣扎、死亡；还有那最为残忍的活体解剖，在不打麻药的情况下，将活生生的人开膛破肚，只为获取所谓的 “科学数据”。
与此同时，基地内的日军军医们也并非都是泯灭人性的机器。杜存山（王志文 饰），一位原本在医学领域有着卓越才华的日本医生，却因被卷入 部队的罪恶体系，内心陷入了无尽的挣扎。他一方面对这些惨无人道的实验感到极度的恶心与愧疚，人性的良知在他心中不断呐喊；另一方面，在日军森严的等级制度和战争狂热的氛围下，他又无力反抗，只能在痛苦中继续为虎作伥。他时常在深夜独自徘徊，眼神中满是迷茫与痛苦，对自己所参与的一切充满了怀疑与悔恨。
顾博轩（李乃文 饰），一名潜伏在 部队内部的中国地下党员，他肩负着更为艰巨的使命 —— 获取 部队细菌实验的关键证据，并将其传递出去，让全世界都知道日军的暴行。他凭借着过人的机智和冷静，在日军的眼皮底下小心翼翼地搜集证据，每一次行动都如履薄冰，稍有不慎便会暴露身份，陷入万劫不复之地。
随着时间的推移，王永章在基地内逐渐结识了一些同样遭受苦难的人。林素贤（孙茜 饰），一位被日军抓来做杂役的善良女性，她亲眼目睹了自己的丈夫和孩子被 部队残忍杀害，心中充满了仇恨。在与王永章的相处中，两人互相扶持，共同在这黑暗的世界中寻找着一丝希望。今村佳代（冯文娟 饰），一名日本护士，最初她对 部队的所作所为一无所知，只以为自己是在从事正常的医疗工作。但随着时间的推移，她逐渐发现了这里的秘密，内心受到了极大的冲击。在良知的驱使下，她开始暗中帮助王永章等人，试图弥补日军犯下的过错。
1945 年 8 月，世界反法西斯战争已进入尾声，日本败局已定。但 部队的恶魔们却不甘心失败，他们妄图在最后时刻完成细菌武器的研发，以此来扭转战局。为了销毁罪证，他们开始疯狂地屠杀 “马路大”，将实验室中的一切资料和设备进行销毁。王永章、顾博轩等人得知这一消息后，深知时间紧迫，他们必须尽快行动，阻止日军的暴行，并将证据传递出去。
在一次混乱中，王永章和顾博轩等人趁机偷取了部分关键的实验数据和文件。然而，他们的行动很快被日军发现，基地内顿时警铃大作，日军展开了全面追捕。在激烈的追逐与对抗中，林素贤为了保护王永章，不幸被日军杀害。王永章悲痛欲绝，但他没有被打倒，心中只有一个信念：一定要完成任务，为死去的家人和同胞报仇。
与此同时，杜存山的内心也在经历着最后的挣扎。看着身边一个个鲜活的生命消逝，他终于鼓起勇气，决定背叛 部队，帮助王永章等人。他利用自己的职务之便，为他们提供了一些关键的线索和帮助，引导他们避开日军的追捕。
在生死攸关的时刻，今村佳代也挺身而出，她巧妙地利用自己在基地内的关系，为王永章等人制造了逃跑的机会。最终，在众人的共同努力下，王永章和顾博轩成功突破重围，将 部队的罪证带出了基地。
