一、产品概述
由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的人白蛋白（Human Albumin）ELISA检测试剂盒（货号：E88-129）为定量检测人白蛋白（Human Albumin）的双抗体夹心酶联免疫吸附测定（Sandwich ELISA）试剂盒。人白蛋白是由ALB基因编码的一种血清蛋白，Uniprot ID为P02768，在维持pH平衡、调节胶体渗透压以及运输脂肪酸、氨基酸、激素等多种化合物中发挥关键生理功能。本试剂盒适用于血清、血浆、脑脊液、乳汁及尿液等多种生物样本中白蛋白浓度的精确测定。
二、技术性能指标
参数 | 规格
检测靶标 | 人白蛋白
反应种属 | 人
检测范围 | 0.69 – 500 ng/ml
适用样本类型 | 血清、血浆、脑脊液、乳汁、尿液
检测方法 | 生物素-链霉亲和素-辣根过氧化物酶（Biotinylated-Streptavidin-HRP）
检测类型 | 双抗体夹心ELISA
三、储存与稳定性
储存条件：2 - 8 °C
有效期：自收货之日起6个月
原产地：美国
请按照指定温度保存所有试剂组分，避免反复冻融。首次使用后，未用完的板条应密封返回原包装，与其余试剂一同存放于2-8°C。
四、试剂盒组分
组分名称 | 规格 | 数量
人白蛋白预包被96孔可拆酶标板 | 1块 | 1
人白蛋白标准品（500 ng/管） | 500 ng/管 | 2
人白蛋白检测抗体 | 12 ml | 1瓶
20倍浓缩稀释缓冲液C | 25 ml | 1瓶
HRP溶液A | 12 ml | 1瓶
TMB底物液 | 12 ml | 1瓶
终止液 | 12 ml | 1瓶
20倍浓缩洗涤液 | 50 ml | 1瓶
封板膜 | - | 6张
五、检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。酶标板已预先包被抗人白蛋白捕获抗体。加入样本或标准品后，样品中的人白蛋白与捕获抗体结合。洗板后加入检测抗体，形成“捕获抗体-白蛋白-检测抗体”复合物。检测抗体经生物素标记，随后与链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶（HRP）结合。加入TMB底物后，HRP催化底物显色，颜色深度与样本中白蛋白含量呈正比。加入终止液终止反应后，在450 nm波长读取吸光度值，根据标准曲线计算样本中白蛋白浓度。
六、样本收集与处理
1. 血清：使用常规采血管收集全血，室温凝固30分钟后，1000×g离心15分钟，取上层血清。
2. 血浆：使用肝素、EDTA或柠檬酸钠抗凝管收集，1000×g离心15分钟，取上层血浆。
3. 脑脊液：常规腰椎穿刺收集，避免溶血，可直接检测或稀释后检测。
4. 乳汁：收集后10000×g离心10分钟去除脂肪层，取中层清液。
5. 尿液：收集晨尿或随机尿，1000×g离心10分钟去除沉淀。
注意：样本收集后应立即检测，或分装后于-80°C保存，避免反复冻融。检测前将样本恢复至室温，根据预实验结果使用1×稀释缓冲液进行适当稀释，确保读数落在标准曲线范围内。
七、检测步骤（简要）
1. 试剂准备：使用去离子水将20×洗涤液和20×稀释缓冲液C稀释为1×工作液。平衡所有试剂至室温。
2. 加样：每孔加入100 µl标准品或稀释后的样本，覆盖封板膜，室温孵育2小时。
3. 洗板：弃去孔内液体，每孔加入300 µl 1×洗涤液，洗涤4次，在吸水纸上拍干。
4. 加检测抗体：每孔加入100 µl检测抗体，室温孵育1小时。
5. 洗板：重复步骤3。
6. 加HRP溶液：每孔加入100 µl HRP溶液A，室温避光孵育30分钟。
7. 洗板：重复步骤3。
8. 显色：每孔加入100 µl TMB底物液，室温避光孵育15-20分钟。
9. 终止：每孔加入100 µl终止液，轻轻震荡混匀。
10. 读板：30分钟内于450 nm波长测定吸光度。
八、结果计算
以标准品浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，使用四参数逻辑斯蒂拟合（4-PL）或线性回归绘制标准曲线。根据样本的吸光度值从标准曲线上计算对应浓度，再乘以稀释倍数即得原始样本中白蛋白含量。
九、性能特征
检测范围：0.69 – 500 ng/ml，可覆盖生理及病理条件下的广泛浓度范围。
灵敏度：最低检测限为0.69 ng/ml。
特异性：抗体特异性识别人白蛋白，与小鼠、大鼠白蛋白无交叉反应。
重复性：批内和批间变异系数（CV）均<10%。
十、注意事项
1. 本产品仅限科研使用，不得用于临床诊断。
2. 不同批次试剂请勿混用。
3. TMB底物液应避光保存，若出现蓝色表明已污染，请勿使用。
4. 终止液含酸性物质，操作时请佩戴防护手套和护目镜。
5. 实验过程中需使用去离子水或蒸馏水。
