Image J进行western blot灰度值计算

  • 设置参数：设置定量参数。Analyze→Set Measurements。在弹出的对话框中勾选Area、Mean gray value、Min & max gray value、Integrated density。
  • 设置单位。Analyze→Set Scale。在弹出的对话框“Unit of length”后面填上“pixels”，其他的不用改动。
  • 打开图片：file-open
  • 转换格式：image-type-8-bit
  • 清除背景：“process” --- "subtract background" --- "Rolling ball radius"为50，并勾上Light background，点击OK即可。
  • 翻转：“edit” --- "invert"
  • 框选目标区域：选择矩形选框工具框选出需要分析的所有条带。
  • 点击“analysis”-“Gels”-“select first lane”，再点击“analysis”-“Gels”-“next lanes”。
  • 当测定完所有条带，选结果中的“Edit”的“Select All”，然后复制数据“IntDen”到Excel表即可进行分析。也可以直接在Results对话框中，选择File → Save as，直接导出excel表格。
  • 点击菜单栏Analyze下拉出现的measurement，即可弹出你选定区域的灰度统计值。
  • 选择直线工具，进行细致的拉选每个泳道的条带。
  • 然后点击“魔棒工具”然后分别点击各个分割好的面积。
  • Result-file-save as/也可以复制量化数据到excel表中。
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