RAS突变见于约30%的人类肿瘤，其中KRAS突变在胰腺癌、结直肠癌、非小细胞肺癌中尤为突出，长期被视作"不可成药"靶点。RMC-6236（通用名Daraxonrasib，又称RAS-IN-2，CAS 2765081-21-6）作为一款口服非共价泛RAS(ON)多选择性小分子，最近两年因独特的三元复合物"分子胶"机制而备受关注。本文从化学与实验操作视角，梳理其分子身份、三元复合物机制、溶解与质控要点，供相关课题参考。
RMC-6236（RAS-IN-2）的化学身份与结构特征
RMC-6236分子式C₄₄H₅₈N₈O₅S，分子量811.05，化学类别属于非共价小分子工具化合物。RMC-6236与RAS-IN-2为同一化合物的不同代号，二者在文献与产品目录中常互换使用，可视为同一研究实体的不同名称。
在体外生化试验中，RMC-6236对野生型KRAS、NRAS、HRAS以及常见致癌RAS变体（G12X、G13X、Q61X系列）展现出28–220 nM的EC₅₀区间；在KRAS G12D胰腺癌细胞系HPAC与Capan-2上，其抑制增殖的EC₅₀进一步下探至1.2–1.4 nM（120 h）。这一活性窗口在已报道的RAS(ON)方向工具化合物中处于较优水平。
与第一代共价KRAS G12C工具化合物锁定"失活态"G12C蛋白不同，RMC-6236直接靶向RAS的"活化态"——即GTP结合的ON状态，并通过亲环素A（CypA）形成三元复合物来稳定结合。这一思路将可成药窗口从单一突变（G12C）扩展到G12D、G12V、G12R、Q61H等多种亚型，是当前RAS靶向研究的一个重要范式转变。
三元复合物的成键逻辑：亲环素A与活化态RAS
RMC-6236的机制核心是"分子胶"型三元复合物。化合物先在胞内与广泛表达的伴侣蛋白亲环素A（CypA）结合，形成二元复合物；该二元复合物随后识别活化态（GTP-bound）RAS蛋白并与之结合，构成"化合物–CypA–RAS"三聚体。这一三聚体在空间上阻断了RAS与下游效应蛋白（RAF家族成员的RAS结合域，以及SHP2磷酸酶）的相互作用，从而抑制pERK等关键信号节点。
生化与细胞水平上，这种阻断表现为：1–30 nM的RMC-6236可在4小时内浓度依赖地下调HPAC、Capan-2等KRAS突变细胞系中的pERK、pAKT、pS6；时间梯度实验显示，对pERK与pS6的抑制可持续48小时，具备长效阻断特征。体内层面，10–25 mg/kg每日口服给药在Capan-2、NCI-H441、HPAC、NCI-H358等KRAS突变异种移植模型中均呈现剂量依赖的肿瘤抑制；与KO-2806联用时，可在NCI-H2122（KRAS G12C）与GP2D（KRAS G12D）模型中诱导明显肿瘤退缩。
RMC-6236的非共价结合模式意味着其活性不依赖某个特定半胱氨酸残基的共价修饰，这也是它能够覆盖多个RAS亚型的结构基础；理解这一点，对于设计合理的对照实验（vehicle、竞争性配体、突变体回补）十分关键。
溶解、分装与储存的实操规范
RMC-6236的几个关键理化与操作参数如下：纯度通常以HPLC法测定≥98%；溶解性方面，DMSO中可达100 mg/mL以上（部分批次250 mg/mL，需超声助溶），乙醇可溶，水溶液几乎不溶。体内给药载体常用10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween-80 + 45% 生理盐水的标准配方，或10% DMSO + 90% 玉米油（口服）方案；这两种配方在文献中均有完整药代与肿瘤暴露数据支撑。
储存条件：固体粉末–20°C密封避光干燥保存，有效期36个月；溶于DMSO后建议–80°C保存6个月内使用，–20°C保存1个月内使用，避免反复冻融。配制工作液时建议现用现配，稀释至目标浓度后立即加样到细胞或动物模型中；分装时按单次用量小体积分装，可显著降低冻融次数对化合物完整性的影响。
操作细节上，建议先以DMSO配制10–25 mg/mL的澄清母液（必要时超声），再以含血清培养基或缓冲液逐级稀释到工作浓度；含血清培养基的稀释比例通常不超过1:1000，以避免DMSO对细胞活力的本底干扰。体内实验的工作液建议当天配制当天使用，隔夜保存可能影响给药体积的准确度。
纯度控制与图谱随附：NMR、LC-MS与HPLC
负责任的科研级来源会随每批次产品附NMR、LC-MS与HPLC三谱图谱，用于在课题开始前确认批次一致性与纯度。¹H NMR可判断分子骨架是否完整、有无降解碎片；LC-MS主峰与分子离子峰（[M+H]⁺ ≈ 811.4）的对照可快速验证分子身份；HPLC面积归一化法则给出≥98%的纯度数值。
研究者在拿到新批次时，建议先以DMSO溶解后做一次LC-MS主峰与分子离子峰对照，再以HPLC面积归一化法复核纯度，避免因批次差异影响细胞活力读数与下游Western blot的pERK抑制曲线。对于跨批次比较的实验（如剂量–反应曲线的EC₅₀漂移分析），应在新批次启用前做一次基线参照实验，把批次效应从生物学效应中剥离出来。
文献中的实验用量与给药方案参考
RMC-6236所代表的"泛RAS(ON)"概念，是过去三年RAS靶向研究的主线之一。同期推进的还包括KRAS G12C选择性化合物（elironrasib / RMC-6291）、KRAS G12D选择性化合物（zoldonrasib / RMC-9805）等"窄谱"分子；RMC-6236则被定位为"广谱"工具，用于解决G12X之外更广泛突变群体的研究需求。2024年发表于Cancer Discovery的转化研究给出了从体外EC₅₀到异种移植肿瘤抑制率的完整剂量–效应数据；2025年Drug Discovery Today综述（DOI: 10.1016/j.drudis.2024.104250）已把RMC-6236与RMC-7977并列为泛RAS(ON)抑制剂的代表分子；其与KRAS G12R、CypA形成的三元复合物晶体结构亦已公开（PDB 9BGC，X射线分辨率1.87 Å），可直接用于结合模式比对。复现这类实验时，体外3–100 nM、每日给药10–25 mg/kg的口服方案是较常引用的起点。
结语
RMC-6236（RAS-IN-2）以三元复合物"分子胶"的独特机制，把RAS(ON)靶向从"单突变可成药"推进到"广谱可成药"。对其化学身份、三元复合物机制与实验操作要点的系统理解，是设计可靠对照实验与解读下游信号读数的前提。
参考文献
Schulze CJ, Seamon KJ, Zhao Y, et al. Chemical remodeling of a cellular chaperone to target the active state of mutant KRAS[J]. Science, 2023, 381(6659): 794-799. DOI: 10.1126/science.adg9652
Filis P, Salgkamis D, Matikas A, et al. Breakthrough in RAS targeting with pan-RAS(ON) inhibitors RMC-7977 and RMC-6236[J]. Drug Discovery Today, 2025, 30(1): 104250. DOI: 10.1016/j.drudis.2024.104250
Tomlinson ACA, Bieder R, Bar Ziv T, et al. Tri-complex of daraxonrasib (RMC-6236), KRAS G12R and CypA[DB]. RCSB Protein Data Bank, PDB ID: 9BGC, X-ray 1.87 Å. DOI: 10.2210/pdb9BGC/pdb
FAQ
Q：RMC-6236与RAS-IN-2是同一化合物吗？ A：是同一分子的不同代号，CAS同为2765081-21-6，分子式C₄₄H₅₈N₈O₅S。
Q：该分子在DMSO中的溶解度？ A：DMSO中≥100 mg/mL（部分批次250 mg/mL，需超声），水不溶。
Q：储存条件？ A：固体粉末–20°C避光干燥36个月；DMSO溶液–80°C半年内使用。
Q：覆盖哪些RAS突变？ A：野生型KRAS/NRAS/HRAS及G12X、G13X、Q61X等致癌变体。
Q：是否依赖共价结合？ A：否，为非共价机制，通过CypA形成三元复合物。
Q：主要应用方向？ A：RAS信号通路机制研究、KRAS突变肿瘤细胞与动物模型实验、联合给药筛选。
Q：是否有公开文献支持？ A：Science 2023机制研究、Drug Discovery Today 2025综述，及PDB 9BGC三元复合物结构。
