肠道免疫系统拥有多种免疫细胞群，这些免疫细胞群离散的分布在淋巴结构中，它们参与针对食物中抗原的免疫反应，同时保持警觉以应对病原体的入侵。ILC控制肠道中的免疫细胞稳态并保护宿主免受微生物病原体的侵害。许多影响ILC发育和分化的细胞内源因素已经被阐明。然而，在肠固有层中调节ILC维持功能的细胞成分鲜为人知。
本研究于2022年发表在Nature Communications上，论文题目为 Intestinal fibroblastic reticular cell niches control innate lymphoid cell homeostasis and function ，通过单细胞测序鉴定了支撑隐斑（CP）和分离淋巴滤泡（ILF）的成纤维网状细胞（FRC），并且发现在表达Ccl19的FRC中，淋巴毒素β受体的敲除可阻断CP转变为成熟的ILF。体内验证证实，持续的淋巴毒素驱动FRC激活IL-7的产生，这对于维持功能性ILC群体至关重要。总之，本研究表明，肠道固有层内的关键成纤维细胞控制着ILC的稳态和功能，从而确保了肠道免疫的保护性功能维持正常状态。
01 孤立性肠淋巴组织（SILT）支撑FRCs的分子表征
为了确定潜在的成纤维细胞ILC生态位，本研究对固有层的成纤维细胞进行了scRNA-seq分析，共鉴定出9个细胞群，其中包含四个表达cd1和pdgfra相关的成纤维细胞群，它们可以通过Cd81的表达进行分离，具有tenascin C (Tnc)表达的Pdgfrahi Cd34lo群主要位于绒毛尖端的远端细胞，编码一组骨形态发生蛋白（Bmp4、Bmp5、Bmp6、Bmp7 和 Bmp1）的 mRNA 在端细胞群中高度富集，编码BMP拮抗剂Grem1和上皮生态位因子如R-Spondins (Rspo2和Rspo3)和Wnt (Wnt2b和Wnt5a)的mRNA在Cd81+滋养细胞和Pdgfralo细胞中富集。进一步对scRNA-seq结果进行分析，鉴定出一小群表达趋化因子Ccl7的细胞群，Clu在该群体中高表达，进而促进了SILT结构中CLU阳性细胞的定位，该结果表明了SILT支撑表达Ccl19 的FRCs的分子表征。
02 FRCs控制SILT的重塑和成熟
通过LTβR的信号转导代表了淋巴结中FRC分化和激活的第一个关键信号，为了评估LTβR介导的FRCs激活在多大程度上影响SILT的形成，本研究将Ccl19-EYFP小鼠和Ltbrfl/fl小鼠进行杂交，研究发现尽管在没有LTβR信号的情况下，SILT FRCs中仍会形成CPs和imILFs，但在Ccl19-EYFP Ltbrfl/fl小鼠中，mILFs的形成完全被消除，定量图像分析显示，Ltbr敲除后SILT FRCs中imILFs的形成在频率和大小上均显著减少。
03 SILT FRC 控制 ILC 稳态和功能
为了评估阻断SILT成熟对小肠中的免疫细胞稳态的影响程度，本研究分析了Ccl19-Cre Ltbrfl/fl小鼠固有层中的细胞组成，分析结果表明，无论是T细胞群还是B细胞群，或者是骨髓细胞亚群，都不受SILT FRCs中Ltbr缺乏的影响。在Ccl19-Cre细胞缺乏Ltbr的情况下，ILC1和ILC3亚群显示固有层细胞数量显著减少。尽管SILT FRCs中Ltbr缺乏，但ILC亚群的相对组成(即Tbet+RORC- ILC1, GATA3+ RORC-ILC2和GATA3- RORC+ILC3)保持不变，在Ccl19-Cre Ltbrfl/fl小鼠中，Lin- CD127+ ILCs的比例和绝对数量显著减少。对ILC增殖和细胞死亡标志物的评估显示，Ltbr 缺失主要影响ILC3的存活，这可以通过GATA3-RORC+亚群中活性caspase 3/7的显著升高来证明。这些数据表明，FRC介导的SLIT成熟对于维持肠固有层中ILC至关重要。
结论和意义
本研究解开了肠道固有层中免疫细胞相互作用和病原体控制的核心过程。高度特化的成纤维细胞的独特部分作为位于固有层中免疫细胞相互作用的纽带，能够控制免疫和免疫病之间的平衡。因此，在SILT FRCs中确定出可成药靶点能够指导治疗方法的发展，以减轻肠道中过度的炎症过程。
参考文献：
Cheng HW, Mörbe U, Lütge M, Engetschwiler C, Onder L, Novkovic M, Gil-Cruz C, Perez-Shibayama C, Hehlgans T, Scandella E, Ludewig B. Intestinal fibroblastic reticular cell niches control innate lymphoid cell homeostasis and function. Nat Commun. 2022 Apr 19;13(1):2027. doi: 10.1038/s41467-022-29734-2. PMID: 35440118; PMCID: PMC9018819.
