芽孢杆菌鉴定试剂盒
HiBacillus™ Identification Kit
概况
该试剂盒包含7种传统生化检查和5种糖发酵检查。微生物的发酵反应，引起培养基颜色发生变化。
用途
鉴定芽孢杆菌
使用说明
待鉴定菌种应先进行分离和纯化。可挑取一个菌落，接种在５ml脑心浸膏肉汤（M210）中，在35-37℃培养4-6小时，直到在620nm处，接种液浊度≥1.0OD。
无菌打开试剂盒，撕掉封条。每孔接种50μl上述菌液。也可用接种环划线。在35℃-37℃孵育24-48小时。
结果判定
依据结果诠释表。在第2孔和第5孔，在24-48小时孵育期结束后，分别添加如下试剂：
1）触酶试验：第6孔
用接种环刮取第1孔内表面，将接种环蘸到含3%H2O2的干净小试管中。
接种环表面冒泡为阳性。接种环表面没有冒泡为阴性。
注意：3%的H2O2需新鲜配置。
2）硝酸盐还原试验：第5孔
加1-2滴对氨基苯磺酸（R015）和1-2滴N,N-二甲基-1-萘胺（R009）
立即出现粉红色为阳性
颜色无变化为阴性
3）伏-普试验：第2孔
加1-2滴Barritt试剂A(R029)和1-2滴Barritt试剂B（R030）
10分钟内出现粉红色为阳性
无颜色变化或有轻微变化为阴性。
4）糖发酵试验：第8孔-第12孔
酸产生导致培养基颜色由红变黄，为阳性反应。
如果仍保持红色，则为阴性。
鉴定的芽孢杆菌物种
蜡样芽孢杆菌（B.cereus）
短小芽胞杆菌（B.pumilis）
枯草芽孢杆菌（B.subtilis）
凝结芽孢杆菌（B. coagulans）
萎缩芽孢杆菌（B. atrophaeus）
巨大芽孢杆菌（B. megaterium）
苏云金芽孢杆菌（B. thuringensis）
储存条件及保质期
2℃-8℃；12个月
引用文献
DebajitBorah, R.N.S. Yadav. UV Treatment Increases Hydrocarbon DegradingPotential of Bacillus spp. Isolated from AutomobileEngines. American-Eurasian J. Agric. & Environ. Sci., 12 (6): 760-763,2012
