NIPT解决的主要问题：如何在不到孕妇的子宫里去抽取胎儿的羊水细胞——直接、精准地检测出胎儿是否患有唐氏综合征（人工流产）

唐氏综合征（Down's Syndrom）：

1. 新生儿患病率1/800，具有特征性面容 ，寿命一般可以到四十来岁，智力低下，生活无法自理。

2. 病因由于患者比正常人多了一条21号染色体（有3条）

3. 孕妇年龄越大，唐氏婴儿概率越大，35岁以上的孕妇，唐氏婴儿高达1/200（进行检测）

在高通量法诞生之前，唐氏综合症筛查方法：

方法一（血清法）：

抽取孕妇的外周静脉血，并测血清中甲胎蛋白的含量高低

若甲胎蛋白含量高，则唐氏儿的可能性大（反之相反） 缺点：假阴性的概率很高（高达1/3）

方法二（羊水法）：

穿刺取羊水细胞（绒毛膜细胞），培养后在显微镜下看染色体（21三体）

准确率100%，但是却有1%的流产风险（穿刺所产生的的影响）

母血（外周血）中有少量胎儿的DNA：

1. 高通量测序技术出现后，出现突破（少量DNA），每个样本一千万条（统计意义极大）

2. 方法：怀孕3个月的孕妇，抽取静脉外周血，血浆抽提血浆游离DNA（5%来源于胎儿），进行高通量测序——比对已知人基因组，看多少DNA比对21号染色体（占1.5%的长度）。

正常婴儿：21号染色体DNA占总血浆游离DNA 7.5/%%

唐氏婴儿：21号染色体DNA占总血浆游离DNA 11.25/%%（多了3.75%%）——确诊后一般建议羊水法——人工流产

高通量测序：

一次一千万条以上的序列，来筛查有多少是21染色体（其他染色体的片段）

仪器：illumina公司verify品牌——1914怀孕妇女的检测结果，假阳性率0.3%，假阴性率0%，准确率非常高

测序数据量和准确性的关系：

1. 能够测到多少21号染色体：泊松分布（当数据量很大的时候就是正态分布了）

随测序量增加，细小的差别被放大

2. 一千万条——3.75%%的差别就是3750条DNA的差别（显著）

判定界限：

理想的判断位点

实际的判断位点：

由于假阴性和和假阳性带来的后果不同（假阳性可以通过羊水穿刺再验证），所以测序公司会更偏向于出现假阳性，从而调整了判定界限

实际的判定方法

其他：

1. 三条染色体的胚胎一般活不到3月龄，除了：21号三体、18号三体、13号三体、性染色体单体或三体。能够存活

这种方法也可以检测18号三体（爱德华综合征）、13号三体（帕陶综合征）的筛查，（大部分也会流产、或1-2年死亡）

2.性染色体异常——1/1000：X、Y、XYY、XXY 能够正常生活，身高智商略差于正常人