做定量前应该做预实验，确定一个合理的模板浓度范围。15到35CT比较合理，超过35个CT那么就算它没有扩增了，如果15之前起峰，那么就是模板浓度太高所引起的
最好做4个组，分析的时候再选取其中3个数据来分析
一、计算
1、简要流程
a.按下列格式整理数据
按基因整理到一起，18s(内参基因）另起一列
1648522970(1).png
b.计算Ct内参基因平均
c.Ct每个基因（包括内参基因）-Ct内参基因平均,得出ΔCt值
d.计算对照组ΔCt均值
e.每个基因ΔCt-对照ΔCt均值，得出ΔΔCt值
f.插入power公式，计算2-ΔΔCt值（这是一个幂函数，是2的-ΔΔCt次方)
number填: 2
power填: -选中ΔΔCt值所在的格
image.png
2、具体解释
qRT-PCR荧光定量数据分析（2 -ΔΔCt法）
image.png
qRT-PCR荧光定量数据分析（2-ΔΔCt法） - 百度文库 (baidu.com)
二、绘图
使用软件：GraphPad Prism
以下是下载及安装教程，采用第二种方法，注意保证此软件始终连接不到网络
Prism9破解版下载 GraphPad Prism(医学绘图软件) v9.3.1.471 免费安装破解版(附安装教程) 下载-脚本之家 (jb51.net)
