"T"代表"transient"，是经过特殊改良以增强其进行瞬时转染能力的HEK 293细胞，这些细胞通常在短时间内表达基因或蛋白质而不将其整合到细胞基因组中。
- 引入T-antigen基因： T-antigen基因通常通过转染技术被引入HEK 293细胞。这可能涉及将T-antigen基因包含在表达载体（如质粒）中，并通过转染剂或其他方法将其引入细胞内。
- 选择性压力： 引入T-antigen的细胞在培养基中添加选择性抗生素（如G418）等，使得只有表达T-antigen的细胞能够存活下来。这种选择性压力确保了细胞系中存在T-antigen的表达。
- T-antigen的表达： 成功引入T-antigen的细胞开始表达T-antigen蛋白。T-antigen对细胞周期的调控和DNA复制有重要作用，因此它的存在可以增强外源DNA的复制和表达。
- 建立稳定的细胞系： 经过选择和表达T-antigen的细胞可以被进一步培养并建立成为稳定的细胞系，即HEK 293T细胞系。
通过引入T-antigen，HEK 293T细胞被赋予了更高的DNA复制和表达能力，从而增加了瞬时转染效率。这使得可以更容易地将外源基因引入细胞中，进行瞬时表达实验，例如在蛋白质表达和功能研究中。
