技术方法-自报告转座子_Cell

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序号:2020-119

编者按:

SRT技术为我们提供了一个全新的认识细胞的角度——从转录因子结合位点(TFBS)来解读细胞异质性以及细胞状态转变。


自报告转座子(SRT)可以同时读取单细胞中的基因表达和转录因子结合的信息

【文献类别】技术方法-自报告转座子

【发表期刊】Cell

【影响因子】 38.6

【发表时间】2020-07-18

【PMID】32710817

【文章摘要】细胞的异质性混淆了转录因子(TF)结合的原位测定。单细胞RNA测序是通过基因表达对细胞类型进行分解归类,但却没有任何技术能将细胞类型与其转录因子结合位点联系在一起。因此,研究人员提出了一种全新的技术——将自报告转座子(self-reporting transposons, SRTs)作为单细胞名片(scCC),可同时检测单细胞中的基因表达以及绘制转录因子结合位点(TFBS)。他们首先从mRNA中获取SRTs的基因组位置,并利用SRTs会与外源TF-转座酶进行融合并沉淀这一特性来定位TFBS。紧接着,研究人员介绍了scCC,它可以从scRNA-seq库中定位SRTs,并由此在同一批细胞中同时识别细胞类型和TFBS。研究人员还利用此技术对多个TF进行了基准测试。接下来他们利用scCC发现了K562细胞中由BRD4介导的细胞状态转变。最后,研究人员使用scCC技术在单细胞分辨率上绘制了小鼠皮层的BRD4结合位点的图谱,建立了原位研究TF生物学的新方式。

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