莎莎写于2020.5.12 ✍今天是护士节，希望在那边的姐姐可以开心快乐。
因为最近老板让订过表达和沉默的载体试剂盒，我实在是一窍不通，所以还是先学习一下再下单吧，接下来的内容是吉玛公司的RNAi使用手册，让我们来一起学习一下。
Ⅰ. RNAi简介
A. RNAi 实验原理
B. RNAi 实验流程
C. RNAi 实验所需试剂
D. 吉玛基因 RNAi 相关产品
Ⅱ. siRNA 设计
A. 哺乳动物 siRNA 设计
B. 吉玛基因 siRNA 产品特性
C. siRNA oligo 技术数据
Ⅲ. siRNA对照
A. 普通阴性对照
B. 荧光标记的阴性对照
C. siRNA 阳性对照
D. 转染试剂对照
E. 避免 off-target 对照
Ⅳ.siRNA(microRNA mimics/inhibitor) 转染
A. siRNA 转染的方法
B. GP-transfect-Mate 转染试剂
C. GP-transfect-Mate 适用的细胞类型
D. 转染前细胞培养
E. 合适的 GP-transfect-Mate 用量
F. 贴壁细胞转染程序
G. siRNA 转染常见问题与建议
H. siRNA-mate 转染试剂
Ⅴ. mRNA 水平 RNAi 效果检测
A. siRNA 细胞转染条件优化
B. Real-Time PCR RNAi 效果检测
C. Real-Time PCR 结果分析
Ⅵ. 蛋白质水平 RNAi 效果检测
A. western-blot 原理
B. western-blot 操作步骤
C. western-blot 上样液的制备
D. western-blot 常用试剂的配制
E. western-blot 结果示例
Ⅶ. 常见问题解答（FAQ）
Ⅰ.RNAi简介
A. RNAi 实验原理
RNA 干扰（RNA interfering，RNAi）现象是由与靶基因序列同源的双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）引发的广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。细胞中的核糖核酸酶 III 家族成员之一的，dsRNA 特异性的核酸酶 Dicer 将 dsRNA 裂解成由 21-25 个核苷酸组成的小干扰 RNA(small interfering RNA，siRNA)，随后 siRNA 作为介导子引起特异性地降解相同序列的mRNA，从而阻断相应基因表达的转录后基因沉默机制。
RNAi原理示意图
B. RNAi 实验流程
C. RNAi 实验所需试剂
D.吉玛基因 RNAi 相关产品
