酵母冻存

冻存酵母

冻存酵母是长期保存液态酵母的有效手段, 专业酵母库(yeast bank)使用深冷机,冷冻温度可达-80摄氏度,几乎可以无时限的存储酵母。家用冰箱冷冻温度一般在-20摄氏度,操作得当酵母冻存一年后的活性能保持在冻存前的70-80%。
冻存酵母操作简单,家酿容易实现。
需要的设备为离心管或样品瓶等带盖可密封容器,天平、量杯等称量设备,电冰箱或冰柜;如果冰箱具备自动除霜功能,须额外准备泡沫箱之类的保温箱和冰袋。

操作时对两个技术点多加注意即可。

  1. 细胞冷冻保护剂的配方;
  2. 操作过程。

1. 细胞冷冻保护剂的配制(1L)

食品级甘油 (CAS:56-81-5):200g
纯水:800g (有条件的可用YEPD替代)
抗坏血酸(Ascorbic Acid,CAS:50-81-7,建议使用,可选,起抗氧化作用):1g

混合均匀,加热灭菌,冷却备用。

2. 操作过程

a. 按常规方法扩培酵母,将培养时间延至48小时,让酵母有足够的时间积累糖原(Glycogen);
b. 将酵母移至4摄氏度环境储存48小时,让酵母积累海藻糖(Trehalose),同时沉淀分层;
c. 倒掉上层培养液,称量剩余酵母泥的重量,加入和酵母泥等量的冷冻保护剂,轻摇混合均匀。此时甘油的浓度为10%。
d. 将混合均匀的酵母液分装,倒入消毒过的离心管或样品瓶中。加盖密封,冷藏24小时;
e. 取出轻轻摇匀,放入冰箱冷冻室,-20摄氏度保存即可。如果冰箱有自动除霜功能,需要将分装后的酵母放置于装有冰袋的保温箱内,连同保温箱一起放入冰箱。

注意事项

  1. 甘油的最终浓度在7.5%-15%区间内为最优,过低无法起到保护作用,过高会伤害酵母。
  2. 冷冻或解冻酵母都建议在冰箱冷藏室过渡24小时。避免酵母承受过大的温度变化率。
  3. 请注意每个操作步骤的灭菌、避菌工作。
  4. 化冻后的酵母使用方法和常规液体酵母相同。

Reference

https://www.jaysbrewing.com/2013/01/31/how-to-freeze-yeast-and-save-money/
http://www.homebrewtalk.com/freezing-yeast.html
White, C. "Yeast: The Practical Guide To Beer Fermentation" .

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