发表期刊：Cell
影响因子：42.5
发表时间：2026年2月11日
研究疾病：复发性胶质母细胞瘤（recurrent glioblastoma, rGBM）
样本类型：复发性胶质母细胞瘤FFPE组织切片（配对治疗前活检和治疗后切除标本）
样本数量：16例患者的49个区域用于CODEX检测、8对配对样本（16个样本）用于Xenium检测和33例患者配对肿瘤和外周血样本用于TCR测序
样本分组：治疗前组和病毒治疗后复发组
应用技术：CODEX多重免疫荧光、Xenium原位RNA检测、Bulk TCRβ测序、免疫组织化学（IHC）等
◎ 文章速览
1. 单次溶瘤病毒诱导持久抗肿瘤免疫：oHSV治疗后CD8+/CD4+T细胞深度浸润肿瘤实质并持续6-25个月，GZMB+T细胞与凋亡肿瘤细胞的空间邻近性与患者生存延长相关，证实T细胞直接杀伤肿瘤的在体证据；
2. 空间极化的T细胞应答结构：肿瘤近端T细胞呈早期激活和组织驻留状态，干性样T细胞定位于远端淋巴样聚集物；残余病毒仅局限于坏死区域，提示晚期应答由肿瘤抗原而非病毒抗原驱动；
3. 预存克隆扩增决定疗效：治疗前已存在的肿瘤浸润T细胞克隆局部扩增达1024倍，与总生存期延长显著相关，且扩增克隆主要识别肿瘤抗原；
4. 缺氧微环境介导治疗抵抗：缺氧性间充质样肿瘤细胞在远端富集并表达VEGFA，形成T细胞排斥区，为联合抗VEGF治疗提供理论依据。
研究背景
胶质母细胞瘤（GBM）因遗传异质性和细胞可塑性，靶向治疗与免疫治疗开发面临重大挑战。尽管免疫检查点阻断在多种癌症中有效，GBM临床试验却屡遭失败，核心问题在于肿瘤T细胞浸润稀疏且多局限于血管周围，难以深入肿瘤实质。溶瘤病毒可选择性在癌细胞中复制并诱导免疫原性细胞死亡，其中基于单纯疱疹病毒1型（oHSV-1）的T-VEC已获批用于黑色素瘤，Teserpaturev（G47Δ）也在日本获批用于复发GBM。近期一项I期临床试验显示，单次注射rQNestin34.5v.2（CAN-3110）溶瘤病毒与GBM患者生存改善相关，并伴随T细胞浸润增加，但其深层机制尚不清楚。本研究利用CODEX多重免疫荧光和Xenium空间转录组技术，旨在解析oHSV治疗后T细胞应答的空间特征、功能状态及与临床预后的关系，为优化GBM免疫治疗策略提供依据。
研究思路
研究结论
本研究通过CODEX多重免疫荧光和Xenium空间转录组技术，系统揭示了单次溶瘤病毒治疗诱导的深度、持久T细胞免疫应答机制。研究发现，rQNestin34.5v.2治疗后CD8+和CD4+T细胞密度显著增加，形成淋巴样聚集物并深度浸润肿瘤实质，持续时间可达6-25个月。关键发现包括：GZMB+CD8+T细胞与cleaved caspase-3+凋亡肿瘤细胞的空间邻近性与患者无进展生存期延长和肿瘤生长减缓显著相关，提供T细胞直接杀伤肿瘤细胞的在体证据；肿瘤邻近T细胞表达早期激活标志物（NR4A1/Nur77、CD69、IFNG、TNF）和组织驻留标志物（ITGAE/CD103、ZNF683/HOBIT），而干性样T细胞分布于远端淋巴样聚集物，形成空间极化的应答结构；残余病毒仅局限于坏死区域，与T细胞浸润区空间分离，提示晚期应答非由病毒抗原驱动；预存肿瘤浸润T细胞克隆在肿瘤局部显著扩增（最高达1024倍），与患者总生存期延长相关，且扩增克隆主要识别肿瘤抗原而非病毒抗原；缺氧性间充质样肿瘤细胞在远离T细胞区域富集，表达VEGFA等免疫抑制分子，形成T细胞排斥区，可能是治疗抵抗的关键机制。
研究意义
该研究首次在单细胞分辨率下系统解析单次溶瘤病毒治疗诱导的持久抗肿瘤T细胞免疫应答，突破GBM"免疫冷肿瘤"的传统认知。研究揭示预存肿瘤反应性T细胞克隆扩增是有效治疗关键机制，而非病毒抗原持续驱动；发现缺氧性间充质样肿瘤细胞形成T细胞排斥区导致治疗抵抗，为联合抗VEGF治疗提供理论依据；建立T细胞-肿瘤细胞空间邻近性作为预后预测指标。这些发现为优化溶瘤病毒载体设计（如添加IL-15或4-1BBL载荷）、筛选免疫治疗获益人群及制定联合治疗策略奠定重要基础，对改善GBM患者临床治疗具有重大意义。
原文链接：
https://doi.org/10.1016/j.cell.2025.12.055
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