在双层琼脂平板法中，下层培养基和上层培养基各自起到不同的作用，确保噬菌体检测和研究的有效进行。
下层培养基的作用
提供支撑：下层培养基通常由较高浓度（1.5%-2%）的琼脂制成，主要作用是提供一个坚固的支撑结构，使上层培养基能够均匀分布在其上，不易流动或变形。
基础营养供应：下层琼脂通常含有基础营养成分，支持细菌的生长。这些营养成分通过扩散可以部分供应到上层培养基，确保细菌在上层能够维持活力和正常生长。
防止扩散过度：由于下层培养基的固化状态，它可以限制噬菌体和细菌在平面上的水平扩散，确保噬菌斑的形成区域集中在上层。这有助于噬菌斑形成的清晰观察和准确计数。
上层培养基的作用
宿主细菌的生长平台：上层培养基通常含有较低浓度的琼脂（约0.7%），形成较软的凝胶状结构，适合宿主细菌的生长。在此环境中，细菌能均匀分布并形成单层，这对于噬菌斑的形成至关重要。
噬菌体扩散与感染：上层琼脂的软质性质允许噬菌体在其中自由扩散，并感染周围的宿主细菌。由于上层培养基是细菌和噬菌体共同存在的环境，因此它是噬菌斑形成的直接场所。
噬菌斑的可视化：由于上层培养基的透明性，噬菌体感染导致细菌裂解后形成的噬菌斑在视觉上容易被观测到。这些噬菌斑通常呈现为透明的区域，便于计数和分析。
总结来说，下层培养基主要提供支撑和营养，而上层培养基则是细菌和噬菌体相互作用的环境，确保噬菌斑的形成和观察。这两层培养基的协同作用是双层琼脂平板法成功的关键。
