大肠杆菌O157计数培养基(膜过滤法)

大肠杆菌O157计数培养基(膜过滤法)

Hicrome™ M- Modified EC0157:H7 Selective Agar Base

用途                                

推荐用于薄膜过滤法初步计数食品中大肠杆菌O157:H7

原理

该培养基推荐用于从肉、禽、奶、婴儿配方乳等食品中分离大肠杆菌O157:H7[1],[2]。它基于三种生化反应(酶)进行鉴别——葡萄糖醛酸酶、山梨醇发酵和赖氨酸脱羧酶[4],大肠杆菌O157为(-)(-)(+)。

培养基中的细菌会先发酵葡萄糖。葡萄糖耗竭后发酵山梨醇,导致pH值下降(酚红为指示剂),使菌落呈黄色。培养基还含有β葡萄糖醛酸酶的显色底物,使菌落为蓝色。对于山梨醇发酵(+)菌或赖氨酸(-)菌,其菌落中的蓝色和黄色叠加为绿色。培养基中有赖氨酸,使赖氨酸脱羧酶阳性菌代谢后使pH值升高,产生粉色菌落。抑制剂中的莫能菌素抑制革兰阳性菌,在44-44.5℃孵育可抑制革兰阴性菌,

 该培养基也用于食品中的大肠杆菌计数[3]。


培养基成分

组成g/L

动物组织酶解物5.000 

酵母粉3.000 

氯化钠5.000 

赖氨酸10.000 

山梨醇20.000 

葡萄糖2.500 

硫酸镁1.500 

脱氧胆酸钠0.150 

葡萄糖醛酸钠0.500 

酚红0.120 

显色混合剂0.050 

琼脂15.000 

最终pH (25°C) 7.2±0.2


配制                                         

62.82g重悬于1000ml蒸馏水,加热至沸腾使完全溶解。请勿高压灭菌。冷却至45-50°C,无菌加入1管添加剂(货号:FD295),混匀并倾注平板。


培养结果             

加入添加剂(货号:FD295)后,44-44.5°C培养18-24小时,结果如下:

 大肠杆菌——绿色

大肠杆菌O157:H7——粉色

肺炎克雷伯菌——黄色

脱氧胆酸钠和添加剂增加选择性——革兰氏阳性菌被抑制


参考文献

1.Entis, P.,and I. Lerner.1997. 24-hour presumptive enumeration of Escherichia coli o157:H7 in food using the ISO-GRID method with SD-39 agar.J.Food Prot. 60:883-890.

 2.Entis, P.1998. Direct 24-hour presumptive enumeration of Escherichia coli o157:H7 in food using the hydrophobic grid membrane filter,followed by serological confirmation : collaborative study.J.AOAC Int. 81:403-418.

 3.Entis, P., and I.Lerner. 1998. Enumeration of #-glucuronidase positive E.coli in foods by using the ISO-GRID method with SD-39 agar.J.Food Prot. 61:913-916.

 4.Corry J.E.L, Curtis G.D.W., Baird R.M., Culture Media for Food Microbiology, Progress in Industrial Microbiology, Volume 37.

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