良好的细胞房环境应该是什么样的呢？首先一定得是清洁的，清洁的同时还要保证无菌，当然了这算是个废话，我们不能费了半天的时间和经历在培养细菌嘛。同时呢细胞房的温度和湿度对于细胞的培养也是至关重要的。
最近我们自己的实验室中就出现了这种大范围的污染情况，对于原代细胞的损失可是特别的让人肉痛。再跟大家说遇到的污染情况之前呢，还是得跟大家先聊一下细胞污染的几种情况：
1.细菌污染（Bacterial contamination）
细菌污染的特征的话，基本上是属于培养液浑浊，PH发生改变，细胞的病理性改变导致胞内颗粒增多，变圆发生脱落死亡。
2. 真菌污染（Fungal contamination）
培养液中漂浮着白色或者黄色的小点，培养液一般不发生浑浊，在显微镜下会看到那种丝状的、树枝状的菌丝在细胞之间，生长缓慢，慢慢的渐渐的营养耗尽细胞脱落死亡。
3. 支原体污染（Mycoplasma contamination）
支原体是一种无核的原核生物，抑制细胞的代谢和生长。当发生这种支原体的污染的时候，基本上宣告所有的细胞都要被扔掉，因为支原体污染最恐怖的一点就是其交叉污染的特性。
今年细胞实验的第一阶段，就慢慢的发现在细胞当中出现了密密麻麻的可以自由移动的黑色小点，首先想到的是添加含有抗支原体药物的三抗，当添加过后第二天，黑色的小点不再运动，但是渐渐的一传十，添加抗支原体药物的细胞状态还是可以的，但是其他的细胞都出现了，一开始还是有耐心，每天都在添加抗支原体药物的，渐渐的失去了控制。
开始第二个阶段的时候，使用新洁尔灭和酒精擦拭培养箱，然后培养箱高温灭菌，细胞房的环境，每次操作前均采用酒精喷洒后，新洁尔灭擦拭地面，渐渐的细胞的状态好了起来。
第三阶段的细胞实验，出现的问题是细胞刚刚复苏后的状态特别的好，但是渐渐的当传代后，细胞的状态每况日下，排除过血清和培养基的问题均没有发生问题，但是在添加抗支原体的药物后，细胞的状态发生了天反复地的改变，所以最终敲定的问题在于细胞房的环境问题。
那如何确定是不是培养基或者说血清的问题呢？我们可以在培养箱中加少量的培养基及培养基和血清的混合物，培养48小时后观察有无污染
如果是细胞房的环境中，排风系统是有故障的，排风不畅，室内的空气不断地变化，天气的炎热，微生物是特别的活跃的，所以这个时候采用5% CuSO4溶液清洗培养箱是没有用的，更不要提究竟或者新洁尔灭了，因为此时的排风系统就是有污染的了。
所以呢，我们只能采用甲醛和KMnO4熏蒸的方式，因为甲醛遇到KMnO4会产生强烈的氧化反应，溅出来是很危险的。那灭菌的整体原理的话，甲醛它可以跟霉菌、细菌的蛋白质结合，使其变性致死；KMnO4是一个强氧化剂，它会使得菌体酶蛋白中的-SH压根华为-S-S-，从而失去酶的活性，代谢机能障碍而死亡。有几点经验想跟大家分享一下：
1. 密闭24小时到48小时使整个的细胞房及空调排放系统等都得到熏蒸，然后彻底的排风使甲醛排放出去，因为甲醛是致癌物质，在确保哦细胞房内无甲醛等刺激性气味的时候才可以进入。
承装反应试剂的器皿的敞口要足够大，因为甲醛的挥发速度是极其迅速的，如果是采用比较小的器皿的话，是比较容易溢出的
2. 配制的比例的话可以按照体积来进行熏蒸，每 立方米加甲醛80毫升，KMnO4 80g，按照2：1的比例，先放入KMnO4，再加入甲醛，一定要迅速。
3. 先放KMnO4再放HCHO，减轻HCHO的挥发，卫生防护，防酸碱手套、口罩
4. 甲醛杀菌受温度、湿度的影响比较明显，所以在熏蒸之前还是要先将细胞房打扫干净的。
最后呢还是希望大家的细胞实验可以顺顺利利的完成，细胞白白胖胖，彻底清除细胞房内的“生物圈”。
