快速冷冻取决于与冷源接触的总表面的百分比，水的体积，水样品的起始温度以及冷源的温度。理想情况下，冷源处于非常低的温度，并被安排接触所有的表面。一块骨骼肌中的冰晶伪影由于冻结太冷而造成的冻结部分“百叶窗” 尽快切片 然而，即使样本成功地快速冷冻成玻璃状，也不会停留在那个方向。
玻璃冰是一个不稳定的状态。 在以上，非晶冰开始逐渐重建为立方冰，并扩张。 在以上，立方冰开始重新形成六角冰，并再次膨胀。 幸运的是，这是一个缓慢的转换过程，取决于温度梯度和水的纯度。
在大多数常见的应用中，组织必须在快速冷冻温度以上进行加热，以便对其进行分割（大脑为但取决于组织类型）。 否则切割太冷，用刀斜面弯曲时会打碎。 切割太冷的明显症状是“百叶窗”或平行于刀片的碎痕。
