背景
1.图片来源。DAB显色的免疫组化图片
2.输出的结果。
统计用的结果是density（mean）
3.光密度（OD）反映蛋白的量。
灰度值：黑0----白255。
步骤
1.光密度校正。具体步骤很容易查到。
2.设置测量参数。 area 和IOD
面积过滤值=100
显示选项中：
NO fill holes， smooth=2，
选area 和IOD
如图设置
3.保存测量环境文件
4.手工描绘测量区域
5.选择色彩。选择HSI
H:0-29
S:不动
I:MAX=光密度校正的背景值相同（靠近255一端）
根据图片的显色，可以适当微调HSI
最后保存选色文件。file-save-
6.设置数据收集器
image----name
count/size----area(---sum) and IOD(---sum)
7.测量
测量选择区域面积：edit-count aoi to objects
在data collector中读取测量数据
然后，delete 测量
重新点AOI自主描绘窗口工具，之前画的框就会自动出现
点击count---在data collector中读取测量数据
小IOD除以大Area.=平均光密度值
8.数据整理
同一样品不同视野的结果取均值=一份样品的结果
同一处理组的不同样品的结果进行统计分析。
注意事项
1.图片的拍摄条件不能变。相同光亮，相同放大倍数，相同曝光条件。
2.不能使用自动拍照功能，必须手动拍照。
3.曝光条件。将空白区域调整到视野中央，通过曝光，使灰度值在230左右，然后校正白平衡，使它显示纯白色。
资料来源链接：免疫组化Image pro plus
