亚细胞定位怎么做
是指某种蛋白或某个基因表达产物在细胞内的具体存在部位，如在胞核，胞浆内，细胞膜或某一特定细胞器上存在。蛋白分布在不同细胞的不同部位，对蛋白的亚细胞定位分析有助于蛋白功能研究的初步判断。
GFP是绿色荧光蛋白，在扫描共聚焦显微镜的激光照射下会发出绿色荧光，从而可以精确地定位蛋白质的位置。GFP实际是给你要研究的物质加上标记，在此相当于报告蛋白的作用。使用GFP必须构建融合蛋白载体，并在转染之后有效表达。这样，若在荧光显微镜下看到细胞内某一部位存在GFP信号，说明和GFP融合的蛋白也存在于该部位，这样就达到了确定某物质亚细胞定位的目的。利用生物信息学软件进行亚细胞定位预测分析辅助于实验操作，能够更加精准的定位蛋白质的位置。
亚细胞定位基本技术路线：
提供序列信息或质粒或菌株——亚细胞定位预测软件分析——植物过表达载体构建——转化农杆菌——农杆菌介导法浸染烟草或者水稻——亚细胞定位——激光共聚焦扫描
详情可以看一下这篇
作者：瑞源生物
链接：https://www.zhihu.com/question/406868331/answer/1338136456
来源：知乎
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