Matrigel matrix是来源于EHS小鼠肉瘤的基质膜几只,含有粘连蛋白、胶原和巢蛋白以及各种生长因子。
康宁(corning)Matrigel,在我们收到货后应该注意什么?如何分装呢?有几个注意事项:
(1)Matrigel一般是干冰运输的,收到货后,看一下页面是否水平,以及是否有融化的迹象;
(2)储存条件:-20℃,长期储存放于-80℃,第一次融化后,分装保存,避免反复冻融
(3)使用/分装前,需要将整瓶Matrigel埋于碎冰中,然后置于4度冰箱中,过夜融化。请勿将Matrigel整瓶直接放到4度冰箱中直接融化。
(4)分装时,与Matrigel胶接触的枪头、ep管均需要预冷,整个操作,需要完全在冰上无菌操作,因为Matrigel基质胶对温度十分敏感,一旦超过10℃,即开始凝胶。所以分装后置于-20℃或者-80℃冰箱中去。
(5)粉状的时候,需要查看一下货号,批次号对应的稀释因子,批次号不同,所对应的稀释因子也是不一样的。康宁官网,输入货号和批次号,选择Quality certificate按钮。比如说288微升,就意味着288微升的Matrigel基质胶原野至于25mL DF-12中,混匀后可以铺4快6孔板。
(6)Matrigel包被过的培养器皿可以于37℃恒温箱或者4℃冰箱中放置一周的时间。
(7)有的可能会做一些免疫荧光之类的荧光检测实验,所以会考虑到背景荧光的干扰。所以尽量采用多聚甲醛来进行固定,要是采用戊二醛的话,会有比较强的背景荧光,这个时候如果要是想减弱一下背景荧光,可以考虑加NaBH4进行淬灭。但是NaBH4极易产生气泡,所以尽量在操作的时候在书评操作台上小心操作,避免晃动。当然最简单的方式莫过于降低戊二醛的浓度,减少背景荧光。