- 接农杆菌5ml，28℃培养摇床，摇至OD600=1.0。
- 8000rpm，5min离心收菌（只要能够收集到菌体就可以），配置一定量的含有0.2mM AS(乙酰丁香酮)，10mM MgCl2，pH5.6（KOH调pH）的10mM MES 溶液，洗菌体，重悬，离心。
- 重复步骤2。
- 重悬后的菌液室温放置3-5小时，用1ml 注射器，去掉针头，注射本氏烟草的叶片下表皮（一般一个基因一株烟草的多片叶子）。
- 注射完成后，擦干净多余的菌液，防止各基因之间的互相感染。
- 最后将农杆菌侵染了的烟草放置培养箱2天， 共聚焦显微镜观察荧光。
以上几种溶液的母液浓度：10mM的MES用KOH调至pH5.6；1M MgCl2；0.1M的乙酰丁香酮。（一般配置10ml的重悬液：分别加10ml，100μL，20μL上述母液）
