一、产品概述
MED12（介体复合物亚基12）是多亚基介体复合物的核心组分，该复合物作为基因特异性转录因子与RNA聚合酶II（RNA Pol II）/通用转录因子机器之间的信号接口，在真核基因转录调控中发挥关键作用。介体复合物最初被鉴定为甲状腺激素受体的共激活因子，随后发现其可作为多种转录因子的共激活因子发挥作用。研究表明，MED12与β-catenin的相互作用是Wnt信号通路依赖性转录所必需的。
本文介绍的由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的A300-774A型兔抗MED12多克隆抗体（货号A300-774A）由美国生产，经抗原亲和纯化，适用于小鼠及人源样本的免疫组化（IHC）、免疫沉淀（IP）和免疫印迹（WB）检测。
二、核心规格参数
参数 | 详细信息
靶标 | MED12（介体复合物亚基12）
反应性 | 小鼠，人
应用 | IHC, IP, WB
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
形式 | 全IgG
免疫原 | 人MED12蛋白第2127位氨基酸至C末端区间
同型 | IgG
标记 | 非偶联
纯度 | 抗原亲和纯化
抗原物种 | 人
浓度 | 1000 ug/ml
储存条件 | 2 - 8 °C
保质期 | 收货后1年
缓冲液 | Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液，pH 7-8，含0.09%叠氮化钠
三、免疫原与识别表位
本抗体采用表位特异性亲和纯化工艺制备。将针对MED12蛋白的特异性表位固定在固相支持物上，从抗血清中亲和捕获并纯化特异性抗体。
A300-774A所识别的表位位于人MED12蛋白第2127位残基至C末端（第2177位残基）之间。编号依据NCBI参考序列NP_005111.2（GeneID 9968）。该C末端区域在MED12与其它转录调控因子的相互作用中具有重要功能意义。
四、浓度测定方法
免疫球蛋白浓度采用比尔定律测定。标准条件下，1 mg/mL IgG在280 nm波长处的吸光度（A280）为1.4。本抗体浓度为1000 ug/ml（即1 mg/ml），可直接按体积量取使用。
应用与实验条件：
通用说明
所有免疫印迹实验均采用5%脱脂牛奶-TBST作为封闭液及抗体稀释液。一抗孵育条件为过夜孵育（4°C推荐）。
推荐稀释比例与用量：
应用 | 推荐稀释比例/用量 | 特殊说明
免疫组化（IHC） | 1:1000 - 1:5000 | 推荐使用pH 6.0枸橼酸盐缓冲液进行抗原修复（FFPE组织切片）
免疫沉淀（IP） | 6 ug/mg 裂解物 | 每mg细胞裂解蛋白使用6 ug抗体
免疫印迹（WB） | 1:2000 - 1:10000 | 推荐使用3-8% Tris-乙酸盐凝胶
二抗选择说明
细胞裂解物免疫印迹：
使用山羊抗兔IgG重链和轻链抗体（货号A120-101P）。该二抗可同时识别兔IgG的重链和轻链，适用于检测总IgG信号。
免疫沉淀产物的免疫印迹：
使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体，并在封闭缓冲液中添加5%正常猪血清（货号S100-020）。这一组合可有效避免免疫沉淀过程中变性释放的抗体重链（约55 kDa）和轻链（约25 kDa）信号对目标蛋白（MED12分子量约230 kDa）检测的干扰。因检测抗体仅识别轻链，重链信号不会被放大，背景显著降低。
五、产品使用与储存
储存注意事项
抗体应储存于2 - 8°C，请勿冷冻。反复冻融会导致抗体聚集和活性下降。缓冲液中含有0.09%叠氮化钠作为防腐剂，可有效抑制微生物污染。
稳定性与保质期
自收货之日起，在推荐的储存条件下保质期为1年。建议分装后使用，避免反复取用引入污染。
免疫组化特别说明：
对于福尔马林固定、石蜡包埋（FFPE）的组织切片，必须进行抗原修复。推荐方法：使用pH 6.0的枸橼酸盐缓冲液，通过微波或高压加热方式进行热诱导抗原修复。修复后按1:1000至1:5000的稀释度孵育一抗。初次使用建议从1:1000开始进行梯度预实验。
