一、准备

    试剂A、试剂B

    蛋白标准品（0.5 mg/mL） 

    96孔板、PBS（稀释用）

二、步骤

（1）工作液

    试剂A：试剂B  =  50:1 按需配置（1孔200μL，排枪加样预多几个孔）

（2）标准品

    1.2 mL蛋白标准配制液 + 一管蛋白标准  →  25 mg/mL

    25 mg/mL  →  0.5 mg/mL

（3）上样

    a）标准品

表1 - 标准品上样示意

    b）样品

表2 - 样品上样示意

加样完毕，37℃ 静置20-30min

（4）检测

    a）酶标仪，562nm

图1 - 酶标仪测量OD值（加样时记得标记，这里方向反了...）

    b）Curveexpert 1.4 拟合直线（注意是直线，BCA法为直线）

        X：OD值

        Y：标准品浓度

图2 - Curveexpert数据录入

图3 - 直线拟合入口

图4 - 直线拟合结果（r>0.99才好）

图5 - 快捷计算入口

    c）计算样品浓度

图6 - 计算样品浓度（输入OD值，Y值即为计算得到的浓度）