NanoTag-抗Halo标签蛋白单域抗体

NanoTag-抗Halo标签蛋白单域抗体-Halo标签融合蛋白的高特异性检测

抗Halo标签单域抗体 (sdAb anti-Halo) 是一种内部研发的单域抗体(sdAb),可特异性结合HaloTag。它能够实现Halo标签融合蛋白的高特异性检测,并且通常与Halo配体同时结合兼容。

HaloTag(1)技术是分子和细胞生物学中广泛使用且高度通用的平台,可用于详细分析蛋白质功能、动力学和分子相互作用。该技术基于一种经基因工程改造的细菌卤代烷脱卤酶,其被修饰后可与合成的Halo配体形成特异且稳定的共价键。这些配体可被多种功能基团修饰,包括荧光团、生物素和亲和标签,从而在活细胞成像、蛋白质纯化和生化分析中实现多样化应用。

与传统的Halo配体不同,抗Halo单域抗体(克隆1A12)识别HaloTag表面暴露的表位,并且通常与Halo配体同时结合兼容,因此在多重应用中保持HaloTag系统的功能完整性。

艾美捷抗Halo标签蛋白单域抗体

货号:N5005-Biotin

克隆号:1A12

宿主:羊驼

生产系统:大肠杆菌

应用:ELISA、免疫荧光(IF)

抗原:HaloTag

靶点:HaloTag

特异性:特异性识别HaloTag,未发现与其他蛋白质的交叉反应。

制剂:DBCO和生物素偶联的sdAb(C端1:1标记)从PBS pH 7.4中冻干。未偶联的sdAb从10 mM KPi、150 mM NaCl、1 mM EDTA pH 6.0中冻干。使用250 uL纯水复溶后立即使用,或用250 uL 50%甘油复溶后于-80°C储存。

分子量:14.9 kDa

消光系数:20128

运输条件:常温

存储条件:含冻干试剂的西林瓶可在2-8°C下保存12个月。复溶后,可在-80°C下保存6个月。工作 aliquots 可在-20°C下保存4周。

注意:仅限体外/研究使用。无毒、无危害性、无传染性。

通过生物层干涉技术(BLI)使用链霉亲和素生物传感器,对固定化的抗Halo单域抗体克隆1A12(生物素化,5μg/mL)与Halo标签分析物(20-0.3125 nM)之间的相互作用进行动力学分析。结合和解离阶段(彩色轨迹)采用1:1结合模型进行全局拟合(黑线)。所得动力学参数显示其具有高亲和力结合特性:结合速率常数kon=(2.96±0.17)×10⁵ M⁻¹s⁻¹,解离速率常数koff=(5.21±0.01)×10⁻⁵ s⁻¹,对应的平衡解离常数KD=176.9±0.2 pM。

参考文献:

Los GV, Encell LP, McDougall MG, et al. HaloTag: a novel protein labeling technology for cell imaging and protein analysis. ACS Chem Biol. 2008;3(6):373-382. doi:10.1021/cb800025k

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