磷酸二酯酶（PDEs）在通过水解作用动态调节第二信使cAMP（环状腺苷酸）和cGMP（环状鸟苷酸）的信号传导中发挥着重要作用。PDE超家族由11个家族组成，其中PDE4、7和8是cAMP特异性水解酶，从而调节对cAMP的正向和负向反应。PDE5在多种组织中表达，如肺、脑、肾、心肌细胞、血小板和阴茎海绵体。它通过磷酸化激活，并通过亚硝基化靶向降解。PDE5在血管张力、视觉、肾和肠道功能、蠕动、细胞生长和凋亡、癌症等方面发挥着作用。其功能使其成为药物干预的首选靶点。抑制剂的开发，主要是针对催化结构域的竞争性抑制剂，促成了西地那非、他达拉非、伐地那非和阿伐那非的商业化，这些药物用于治疗勃起功能障碍、肺动脉高压和下尿路症状（LUTS）。PDE5抑制剂还显示出作为癌症治疗的潜力，当在结直肠癌（CRC）术后使用PDE5抑制剂时，转移风险降低。继续了解PDE5的作用以及开发新的特异性治疗工具，将为PDE5相关疾病开辟新的治疗途径。
PDE5A1检测试剂盒是一种荧光偏振（FP）均相384孔板试剂盒，专为筛选和鉴定PDE5A1（磷酸二酯酶5A1）抑制剂而设计。该试剂盒利用了一种特定的荧光磷酸盐结合纳米颗粒。试剂盒包含足够用于400次反应的纯化重组PDE5A1、荧光探针、PDE检测缓冲液、结合剂和稀释液。
检测使用了标记有荧光素的环状鸟苷酸单磷酸（cGMP-FAM用于PDE5A1），其中磷酸基团嵌入在环状核苷酸中。这是一种非常小的分子，旋转速度快（FP值低）。PDE5A1催化环状核苷酸中磷酸二酯键的水解，释放出磷酸基团。在第二步中，自由的磷酸基团被一种特定的磷酸盐结合纳米珠（结合剂）识别，形成一个大复合物，其运动受到限制（FP值高）。FP值与PDE5A1活性成正比。
该检测需要一台能够测量荧光偏振（FP）的荧光微孔板读取仪，并配备用于读取FP信号的必要部件。如需了解更多关于FP技术的信息，请访问我们的技术说明：FP、检测原理及应用。
艾美捷BPS Bioscience-PDE5A1检测试剂盒：
货号：60351
试剂盒格式：荧光偏振
物种：人类
产品形式：试剂盒包含足够用于400次反应的纯化重组PDE5A1、荧光探针、PDE检测缓冲液、结合剂和稀释液。
储存/稳定性：如果按照说明储存，该试剂盒在收到之日起6个月内可达到最佳性能。
应用范围：用于研究酶动力学，并在高通量筛选（HTS）应用中筛选小分子抑制剂以助力药物发现。
运输温度：-80°C
科学分类：磷酸二酯酶
仅限研究使用
禁忌事项：
检测中DMSO的最终浓度不应超过1%。
具有荧光特性的化合物可能会根据其光谱激发和发射特性干扰检测结果。
建议单独测试化合物，以确定其是否会对检测结果产生潜在干扰。
检测结果示例：
图：PDE5A1与不同浓度的伐地那非（#27776）在300 nM FAM-环状-3'，5'-GMP底物存在下孵育。使用Tecan M1000荧光微孔板读取仪测量荧光偏振，该仪器配备用于FP的装置。结果以活性百分比表示，其中无抑制剂（阳性对照）时的FP值设为100%。
文献参考：
Ahmed W., et al., 2021 Biomedicine & Pharmacotherapy 134:111128.
Huang W., et al., 2020 Nat Commun 11:3191.
